一种固相合成侧链保护肽链的新方法

摘要

本发明为一种固相合成侧链保护肽链的新方法，属于有机化合物和多肽固相合成与制备技术领域。在肽链合成中，为了获得较大的肽链片段，需要利用侧链保护的肽链片段在液相中进行拼接，而常用的多肽固相合成树脂进行肽链合成时，应用酸性裂解试剂将肽链从树脂上切落，同时肽链的侧链保护基也被脱除，得到的是非保护的肽链。本发明通过在树脂上连接一段“手柄”，对树脂改进，在“手柄”上进行肽链合成，利用弱碱性条件将肽链从“手柄”上切割下来，不会脱除侧链保护基，可用于侧链保护肽链的固相合成。

主权项

一种固相合成侧链保护肽链的方法，包括如下步骤：(1)在固相合成的Merrifield树脂或Wang树脂上连接一段“手柄”，所述“手柄”的结构式如式(I)：断键处与树脂连接，其中当所用树脂为Merrifield树脂时，X为HO，当所用树脂为Wang树脂时，X为Cl或Br，(2)在“手柄”上进行肽链的合成，(3)最后将肽链从“手柄”上切落，获得侧链保护基保留的肽链，其中，当固相合成树脂为Merrifield树脂时，采用羟乙酸在碳酸铯作用下与Merrifield树脂反应在Merrifield树脂上引入“手柄”，然后将肽链C端第一个氨基酸与DIC和DMAP的混合反应液与树脂上“手柄”反应完成第一个氨基酸连接到“手柄”上，接着脱除氨基保护基，再将下一个待连接氨基酸与苯并三氮唑‑N，N，N’，N’‑四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)、1‑羟基‑苯并三氮唑(HOBt)和二异丙基乙胺(DIPEA)混合反应液与树脂反应，实现肽链C端第二个氨基酸的连接，重复第二个氨基酸连接的操作，直至完成肽链连接，最后采用氢氧化钠或四丁基氢氧化铵的DMF和水的混合溶液将肽链从树脂上切落，得到侧链保护基全保留的肽链；当固相合成树脂为Wang树脂时，采用氯乙酰氯或溴乙酰溴在三乙胺的作用下与Wang树脂反应在Wang树脂上引入“手柄”，然后将肽链C端第一个氨基酸与碳酸铯混合反应液与树脂上“手柄”反应完成第一个氨基酸连接到“手柄”上，接着脱除氨基保护基，再将下一个待连接氨基酸与苯并三氮唑‑N，N，N’，N’‑四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)、1‑羟基‑苯并三氮唑(HOBt)和二异丙基乙胺(DIPEA)混合反应液与树脂反应，实现肽链C端第二个氨基酸的连接，重复第二个氨基酸连接的操作，直至完成肽链连接，最后采用氢氧化钠或四丁基氢氧化铵的DMF和水的混合溶液将肽链从树脂上切落，得到侧链保护基全保留的肽链。