一种快速鉴定驴皮、马皮和骡子皮的检测试剂盒

摘要

本发明从马、驴和骡子的遗传背景出发，创新性的同时使用CKM核基因(nDNA)和线粒体基因组DNA(mtDNA)的16SrRNA基因对驴、马、马骡和驴骡进行准确的鉴别，本试剂盒采用分子信标探针(MB)法进行5重多色荧光定量PCR检测技术，同时能检测驴、马、马骡及驴骡四种成分，而且本试剂盒中加入外源性内参作为内标，可检测和避免因样本含有PCR抑制物而产生的假阴性结果。5重多色荧光定量PCR是在同一管内检测，无需开盖，不易污染，具有准确稳定、操作简单，灵敏度极高特异性强等有益效果，为驴皮、马皮及骡子皮的鉴定探索了新的途径。

主权项

一种鉴定驴皮、马皮、骡子皮的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒使用的引物和探针为：马和驴CKM核基因(nDNA)通用引物：CKMF:5'AAGAAGCTGCGGGACAAGG3'CKMR:5'CAGCCCACGGTCATGATGA3'马的CKM核基因特异探针：CKM‑MP：5'CGCGAGAGTGGAAAGAATGAGAGGCAGAACTCGCG3'驴的CKM核基因特异探针：CKM‑LP：5'CGCGAGAGTGGAAAAAATGAGAGGCAGAACTCGCG3'马和驴的线粒体16SrRNA基因通用引物：MtUF:5'ATAAGACGAGAAGACCCTATGGAGC3'MtUR:5'AGGATTTTCTGTTCTCCGAGGTCAC3'马的线粒体16SrRNA基因特异探针：mtMP：5'CGCCACAAACCTAACCTTCAGGGACAGGCG3'驴的线粒体16SrRNA基因特异探针：mtLP：5'CGCCAAACCTAACCCTCAGGGACAACCGCC3'内参引物：IACF:5’ACCGTTACCGAGTCCAGGTG‑3’IACR:5’TTCGGACTCGATCAGAGCAC‑3’内参探针：IACP：5’‑CGACGGTCCTTTCTAATGTTGCGTCG‑3’。