通过组织培养持续获得人参毛状根次生代谢产物的方法

摘要

本发明公开了一种通过组织培养持续获得人参毛状根次生代谢产物的方法，该方法的步骤包括（1）植物体批量获得：将植物体处理后接种入培养用反应器装置中，进行培养参数设定后，进行规模化培养，根据需要进行下一步的操作，所述植物体是指无菌培养下获得的植物细胞、植物组织、植物器官和丛生芽等状态；（2）植物次生代谢产物产生及诱导：将获得的植物体在一定的培养条件下生成或进行诱导以获得需要的次生代谢产物；（3）植物次生代谢产物的收集和提取；将人参毛状根取出后按照人民药典2010年版测定人参总皂甙以及人参皂甙Re+Rg的含量，经检测所获得的人参毛状根中人参总皂甙含量可达到6.182%，人参皂甙Re+Rg的含量可达到0.3752%。

主权项

一种通过组织培养持续获得人参毛状根次生代谢产物的方法，包括以下步骤：（1）植物体批量获得：将植物体处理后接种入培养用反应器装置中，进行培养参数设定后，进行规模化培养，根据需要进行下一步的操作，所述植物体是指无菌培养下获得的植物细胞、植物组织、植物器官和丛生芽等状态；（2）植物次生代谢产物产生及诱导：将获得的植物体在一定的培养条件下生成或进行诱导以获得需要的次生代谢产物；（3）植物次生代谢产物的收集和提取：根据次生代谢产物存在的部位，以及次生代谢产物的特性进行次生代谢产物的收集提取操作以获得所需；在步骤（1）中，植物体为人参毛状根，人参毛状根的批量获得：所述培养参数主要有：将人参毛状根接种入实施例1中所述的装置中，接种密度：120个/L，分开接种3层，每层40个，调整好培养基后进行培养，其中：培养基配方为：Ms+0.1 mg/L IBA +30 g/L蔗糖；培养基pH：5.8；浸没频率：3min/4h；培养条件：光照强度2000 lux，光照时间8 h/d，培养温度25±1℃，培养时间：10d；在步骤（2）植物次生代谢产物的诱导中：利用可拆卸的设计方便更换培养液为：Ms+30 g/L蔗糖；培养基pH：5.8；浸没频率：10min/2h；培养条件：光照强度1000 lux，光照时间5 h/d，培养温度25±1℃，培养时间：90d；在步骤（3）植物次生代谢产物的收集和提取中：将人参毛状根取出后按照中国人民药典2010年版测定人参总皂甙以及人参皂甙Re+Rg的含量，经检测所获得的人参毛状根中人参总皂甙含量可达到6.182%，人参皂甙Re+Rg的含量可达到0.3752%；所述步骤（1）中的培养用反应器装置包括反应器罐体盖子（3），具有螺纹，与反应器罐体（4）连接，储液罐（8）上部具有螺纹与反应器培养罐体（4）下部密封结合，储液罐盖子（7）具有与储液罐（8）相配合的螺纹可与储液罐（8）密封结合；培养用反应器装置主体直径为20cm，装置主体高度30cm；所述步骤（2）中的多层培养网架（6）为可耐高温高压灭菌材料，网孔大小0.5mm左右以支撑植物体材料并使培养液顺利通过为准，网架之间利用可组装拆卸支柱支撑；网架间距为5cm。