一种辣椒根RNA提取方法

摘要

本发明涉及一种辣椒根RNA提取方法，属生物技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种成本较低、效率较高的辣椒根RNA提取方法。本发明提取的辣椒根RNA的方法包括如下步骤：称取0.1g辣椒根，研磨后加入预热的裂解液和β-巯基乙醇，涡旋后水浴，加氯仿/异戊醇(24/1)离心，取上清加等体积的氯仿/异戊醇(24/1)后再离心，加入沉淀剂沉淀后离心，乙醇洗涤并回收RNA。本发明操作简单，节约成本，能够很好的提取辣椒根RNA。

主权项

一种辣椒根RNA提取方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取2ml离心管，加CTAB提取液1ml，在65‐70℃水浴中预热10min；(2)液氮中研磨0.1g辣椒根；(3)将预热过的CTAB提取液加入到研钵中裂解，加入β‐巯基乙醇，裂解完毕后重新装入离心管，激烈涡旋30s，然后放回65‐70℃继续水浴；(4)向离心管中加入等体积的氯仿/异戊醇混合液并涡旋混合，在10000rpm，4℃离心15min；(5)将上清液转移至一新的离心管，重复抽提一次；(6)继续将上清液转移至另一新离心管中，再加入异丙醇，在4℃下沉淀2h；(7)然后在4℃，12000rpm条件下离心20‐30min，振荡混匀分层后，再室温静置5～10min，弃上清液，用500μL70％乙醇洗沉淀，继续在4℃，12000rpm条件下离心5min，然后再用500μL100％乙醇洗沉淀1～2次；(8)弃上清，吹干后用30μLDEPC水溶解RNA。