神经生长因子缓释纳米载体的制备及应用

摘要

本发明提供一种神经生长因子缓释纳米载体的制备方法，将神经生长因子和聚乳酸-羟基乙酸共聚物通过乳化挥发溶剂法制成球形纳米粒子。所述的聚乳酸-羟基乙酸共聚物包裹的神经生长因子纳米缓释系统是核壳结构，其核是神经生长因子，外壳是均匀、致密的聚乳酸-羟基乙酸共聚物，本发明解决了现有的神经生长因子在体内分布半衰期和生物活性半衰期较短、代谢快、易被酶解，在水溶液中极不稳定的问题。本发明方法操作简单、过程可控。本发明对神经生长因子的应用范围进行了二次开发，拓展了其药用范围，可利用神经生长因子纳米缓释系统的神经保护作用，将其应用于制备糖尿病合并冠心病的药物。

主权项

一种神经生长因子缓释纳米载体的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现： （1）制备内水相、油相和外水相：内水相W1为NGF加入体积百分数为5% 的聚乙二醇；油相O为PLGA溶于二氯甲烷与丙酮体积比为3:1的混合溶液，聚乳酸‑羟基乙酸共聚物PLGA浓度为1.25%；外水相W₂为体积百分数为0.7%的聚乙烯醇水溶液；（2）制备包裹NGF的PLGA微球：将所述内水相W1加入油相O中，100W冰水中超声1min制备油包水型乳液W1/O，将W1/O乳液加入含0.7% 聚乙烯醇的水溶液中，W1/O乳液与外水相W2体积比为1：5；55W冰水中超声20min，得到水包油包水型复乳W1/O/W2，将均匀的复乳倒入离心管中，51摄氏度真空旋蒸25min，以挥发溶剂； （3）离心、冲洗、干燥、冷藏包裹神经生长因子的聚乳酸‑羟基乙酸共聚物微球：将步骤（2）乳液收集后，20000rpm，4°C离心20min，用蒸馏水冲洗沉淀3次洗净纳米粒表面的聚乙烯醇以及游离的蛋白，然后收集纳米粒，‑20℃冷冻干燥24h，冰冻干燥后，将冻干的包裹神经生长因子的聚乳酸‑羟基乙酸共聚物纳米微球储存于2‑8℃冰箱中。