一种山羊肉用性状快速高效选育方法

摘要

本发明涉及畜禽育种技术领域，尤其是一种山羊肉用性状快速高效选育方法，包括以下步骤：体重测定、DNA样采集、引物合成、模板PCR扩增引物、基因型判定与分型、不同基因型个体PCR产物的测序验证、个体MBLUP遗传评估、选配建立家系、群体继代选育形成核心群体、优良基因人工扩散；本发明通过通过测定体重和检测分子标记基因型，以MBLUP技术评估种羊育种值进行选配，按设计的选育目标在选育后代中进行体重测定和基因型检测，以MBLUP法进行群体继代选育。最终形成黔北麻羊肉用新品系。以黔北麻羊的选育为例，通过本方法选育出的黔北麻羊肉用型核心群体公羊和母羊的体重分别比基础群体提高14.12kg、9.61kg。

主权项

一种山羊肉用性状快速高效选育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)性能测定：主要对山羊肉用性状的主要指标体重进行测定；测定时，要记录好每只山羊的体重、性别、年龄、耳标号，并收集山羊的系谱资料；所述的体重测定时，羊只禁食16～24h，禁饮2h后空腹称测山羊的重量，单位为kg；(2)DNA样采集：按常规方法采集每只山羊的血样或耳组织样，并提取样品DNA，每只山羊的DNA样要与其耳标号一一对应；(3)标记基因引物合成：将DNA样合成包含目的基因中与山羊体重显著相关的SNP位点的特定引物；(4)模板PCR扩增引物：将2×Taq PCR MasterMix、ddH₂O、引物、模板DNA混合构建成PCR反应体系，其中2×Taq PCR MasterMix为5μL、ddH₂O为3.4μL、引物为0.8μL、模板DNA为0.8μL；混合均匀后，进行PCR扩增，获得扩增产物；(5)基因型判定与分型：将扩增产物在99℃下变性5min后，置于10％的聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳，电泳完毕后，进行硝酸银染色拍照，并根据电泳结果直接判定个体基因型；(6)不同基因型个体PCR产物的测序验证：对不同基因型个体各5个50μL扩增体系，经琼脂糖凝胶检测，有目的条带后，进行基因纯化测序；记录各个个体的基因型，均与体重、DNA样、个体耳标号要一一对应；(7)个体MBLUP遗传评估：将各个体系谱、年龄、性别、基因型和体重信息纳入标记辅助BLUP(MBLUP)模型估计出各个个体的育种值，其模型如下：y＝Zu+Qν+e其中：y为体重测量值向量；u为育种值随机向量，其均值为0，方差协方差矩阵为ν是固定分子标记效应向量，e为误差向量，其均值为0，方差协方差矩阵为Z、Q是相应的关联矩阵；随机向量u和误差向量e的数学期望和方差定义为：$E\left(\begin{array}{c}u\\ e\end{array}\right)=\left(\begin{array}{c}0\\ 0\end{array}\right)\mathrm{Var}\left(\begin{array}{c}u\\ e\end{array}\right)=\left(\begin{array}{c}G,0\\ 0,R\end{array}\right),G=A{\sigma }_A^2,{\sigma }_e^2={\sigma }_y^2-{\sigma }_A^2={\sigma }_y^2(1-h^2)$A为所有个体的血缘系数矩阵，为个体育种值方差；(8)山羊选配建立家系：以公羊为单位，选取育种值较近的山羊作为家系建立个体(各家系公羊育种值不能低于母羊育种值，公母羊之间应避免近交，公母羊三代内无共亲关系)，每个家系母羊≥15只，至少建立30个家系；(9)山羊群体继代选育形成核心群体：按照山羊肉用性状快速高效选育目标，在步骤8)的家系后代中进行体重测定和基因型检测，以MBLUP法进行群体继代选育，重复步骤1‑8)≥二世代后，即可获得山羊肉用核心群体；(10)优良基因人工扩散：在核心群体中，母羊直接送到保种区去作种羊；公羊采用人工授精的方式，在山羊群体中进行山羊扩繁。