酸性磷脂酶的克隆、表达及应用

摘要

本发明涉及一种DNA序列，其编码具有磷脂酶活性但基本上不具有脂肪酶活性的多肽，其特征在于所述DNA序列选自a)含有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的DNA序列，b)含有SEQ ID NO:1所示编码序列的DNA序列，c)编码SEQ ID NO:2所示蛋白序列的DNA序列，d)由具有图7所示限制性内切酶图谱的质粒pPL3940-Topo2.5编码的DNA序列，该质粒保藏号为DSM 22741，e)能在严格条件下与a)、b)、c)或d)的DNA序列之一杂交的DNA序列，f)由于遗传密码的简并性而与a)、b)、c)、d)或e)的DNA序列相关的DNA序列，以及g)a)至f)的序列的互补链，其中所述DNA序列优选地来自曲霉，更优选地来自烟曲霉；本发明还涉及一种具有磷脂酶活性但基本上不具有脂肪酶活性的多肽，其选自a)由上述DNA序列的编码部分编码的多肽，b)具有SEQ ID NO:2所示序列或由其衍生的序列的多肽，其可以通过对一个或多个氨基酸的置换、增加或缺失获得，c)与SEQ ID NO:2的氨基酸1至299有至少83%同一性的序列的多肽，d)由可与下述序列在严格条件下杂交的核酸序列编码的多肽：(i)SEQ ID NO:1的核苷酸55至1106，(ii)SEQ ID NO:1的核苷酸55至1106中包含的cDNA序列，(iii)由至少100个核苷酸组成的(i)或(ii)中的部分序列，或(iv)(i)、(ii)或(iii)的互补链，e)具有SEQ ID NO:2序列的多肽的变体，其包含对一个或多个氨基酸的置换、缺失和/或插入，f)a)至e)的氨基酸序列的等位基因变体。

主权项

一种核酸分子，其DNA序列编码具有磷脂酶活性但不具有脂肪酶活性的多肽，所述脂肪酶活性是通过水解棕榈酸对硝基苯酯来以光度测定法测定，其特征在于所述DNA序列选自：a)SEQ ID NO:1所示的DNA序列，b)SEQ ID NO:1所示编码序列所示的DNA序列，c)编码SEQ ID NO:2所示蛋白序列的DNA序列，d)由具有图7所示限制性内切酶图谱的质粒pPL3949‑Topo2.5编码的DNA序列，该质粒保藏号为DSM22741，e)由于遗传密码的简并性而与a)、b)、c)或d)中DNA序列相同的DNA序列，并且f)a)至e)的序列的互补链。