发明名称 |
一种高效丝氨酸羟甲基转移酶体外进化的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种高效丝氨酸羟甲基转移酶体外进化的方法,步骤包括:对多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因进行PCR扩增;上述多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因体外低能离子注入,构建载体并转化受体菌;筛选高活性的丝氨酸羟甲基转移酶菌株并测序。本发明的有益效果在于,利用低能离子辐照技术,将低能离子直接作用于不同来源丝氨酸羟甲基转移酶基因,造成丝氨酸羟甲基转移酶基因体外辐照损伤和修饰,再与载体连接、转化受体菌,经体内修复与突变后,对突变基因文库进行表达和筛选,获得丝氨酸羟甲基转移酶突变基因,完成体外进化。本方法亦可应用于其他酶分子的体外进化。 |
申请公布号 |
CN104017819A |
申请公布日期 |
2014.09.03 |
申请号 |
CN201410286347.7 |
申请日期 |
2014.06.23 |
申请人 |
中国科学院合肥物质科学研究院 |
发明人 |
赵根海;郑之明;王鹏;王丽;刘会;贡国鸿;吴跃进 |
分类号 |
C12N15/70(2006.01)I;C12N9/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/70(2006.01)I |
代理机构 |
安徽汇朴律师事务所 34116 |
代理人 |
汪蕙 |
主权项 |
一种高效丝氨酸羟甲基转移酶体外进化的方法,其特征在于,步骤包括:(1)对多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因进行PCR扩增;(2)所述多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因体外低能离子注入,构建载体并转化受体菌;(3)筛选高活性的丝氨酸羟甲基转移酶菌株并测序。 |
地址 |
230001 安徽省合肥市西郊董铺1130号信箱 |