发明名称 一种高效丝氨酸羟甲基转移酶体外进化的方法
摘要 本发明公开了一种高效丝氨酸羟甲基转移酶体外进化的方法,步骤包括:对多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因进行PCR扩增;上述多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因体外低能离子注入,构建载体并转化受体菌;筛选高活性的丝氨酸羟甲基转移酶菌株并测序。本发明的有益效果在于,利用低能离子辐照技术,将低能离子直接作用于不同来源丝氨酸羟甲基转移酶基因,造成丝氨酸羟甲基转移酶基因体外辐照损伤和修饰,再与载体连接、转化受体菌,经体内修复与突变后,对突变基因文库进行表达和筛选,获得丝氨酸羟甲基转移酶突变基因,完成体外进化。本方法亦可应用于其他酶分子的体外进化。
申请公布号 CN104017819A 申请公布日期 2014.09.03
申请号 CN201410286347.7 申请日期 2014.06.23
申请人 中国科学院合肥物质科学研究院 发明人 赵根海;郑之明;王鹏;王丽;刘会;贡国鸿;吴跃进
分类号 C12N15/70(2006.01)I;C12N9/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/70(2006.01)I
代理机构 安徽汇朴律师事务所 34116 代理人 汪蕙
主权项 一种高效丝氨酸羟甲基转移酶体外进化的方法,其特征在于,步骤包括:(1)对多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因进行PCR扩增;(2)所述多种来源的丝氨酸羟甲基转移酶基因体外低能离子注入,构建载体并转化受体菌;(3)筛选高活性的丝氨酸羟甲基转移酶菌株并测序。
地址 230001 安徽省合肥市西郊董铺1130号信箱