发明名称 离心沉降辅助植物转基因的方法
摘要 一种离心沉降辅助植物转基因的方法是:将植物受体材料与农杆菌混合后在合理的转速下进行离心沉降处理,最终获得阳性转化子。离心沉降不仅可以增加受体材料的创伤面积,而且使农杆菌在离心力作用下深入到受体材料内部,显著提高了植物转基因效率。
申请公布号 CN104017825A 申请公布日期 2014.09.03
申请号 CN201410283216.3 申请日期 2014.06.23
申请人 上海交通大学 发明人 王贵荣;李斌连;唐克轩
分类号 C12N15/84(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I 主分类号 C12N15/84(2006.01)I
代理机构 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人 杨元焱
主权项 一种离心沉降辅助植物转基因的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,通过植物组织培养技术,得到无菌的植物材料;步骤二,从获得的无菌植物材料中切取受体部位,作为植物受体材料;步骤三,将包含有目的基因的农杆菌活化到转化状态后,在5000‑10000rpm条件下离心并重悬,得到农杆菌重悬液;步骤四,把植物受体材料浸泡到农杆菌重悬液中,再次进行离心处理;步骤五,将步骤四中离心处理后的材料转移到无菌玻璃器皿中静置15‑20分钟;步骤六,静置时间结束后,把感染后的植物材料从玻璃器皿中取出来,用无菌滤纸吸干残留的菌液,然后转移到共培养基中共培养;步骤七,共培养结束后,将感染过的植物受体材料在选择压力下进行筛选,最终获得阳性转化子。
地址 200240 上海市闵行区东川路800号