检测稀有循环细胞内多种信号转导分子的基于抗体的阵列

摘要

本发明提供了用于检测稀有循环细胞内众多信号转导分子的活化状态和/或总量的基于抗体的阵列以及使用该阵列来帮助癌症预后和诊断及设计个性化、定向治疗的方法。

主权项

下列物质在制造用于疾病的诊断或预后的试剂盒中的用途，所述试剂盒用于进行具有高动态范围的多重、高通量免疫测定，其中所述物质包括(a)和(b)中的物质： (a)众多对一种或多种分析物特异的捕获抗体，其中所述捕获抗体局限在固相支持体上；和 (b)众多检测抗体，其中所述检测抗体包含： (1)众多用葡萄糖氧化酶标记的活化状态非依赖性抗体，所述抗体对一种或多种分析物具有特异性而不考虑它们的活化状态，和 (2)众多用信号放大对的第一成员标记的活化状态依赖性抗体，所述抗体对一种或多种分析物的特定活化状态具有特异性，其中所述信号放大对的第一成员是过氧化物酶， 所述免疫测定包括： (i)将细胞提取物与该细胞提取物中一种或多种分析物的特异性的所述捕获抗体的众多稀释系列一起培育以形成众多捕获分析物，其中所述捕获抗体局限在固相支持体上； (ii)将所述众多捕获的分析物与相应分析物的特异性的所述检测抗体一起培育以形成众多可检测的捕获分析物， 其中所述葡萄糖氧化酶产生导向信号放大对的第一成员并与其反应的过氧化氢(H₂O₂)； (iii)将众多可检测的捕获分析物与信号放大对的第二成员一起培育以产生放大信号；和 (iv)检测信号放大对的第一和第二成员产生的放大信号。