一种b型流感嗜血杆菌发酵液的细菌荚膜染色方法

摘要

本发明公开了一种b型流感嗜血杆菌发酵液的细菌荚膜染色方法，它包括预处理、制片、涂片、干燥、染色、二次干燥和镜检几个步骤。本方法采用负染色原理，保证了细菌荚膜的完整性，菌体范围大，容易辨认；染色效果好，荚膜与背景颜色对比明显，容易观察；操作过程简单，对实验员的操作技能要求不高，实验成功率高。

主权项

一种b型流感嗜血杆菌发酵液的细菌荚膜染色方法，它包括以下步骤：A．制片：b型流感嗜血杆菌发酵液滴于载玻片上，与绘图墨水混合均匀；B．涂片：取干净的盖玻片，涂片；C．染色：用沙黄对载玻片上的b型流感嗜血杆菌染色，在载玻片上滴浓度为0.5%沙黄溶液1～3滴，固定1.5～2.5min后用水将涂片上的沙黄溶液洗去；D．镜检：将载玻片置于油镜下观察，观察到的菌体与背景为明亮的淡红色，荚膜无色；其特征在于，（1）制片前还包括预处理，所述预处理的方法为：取b型流感嗜血杆菌发酵液1ml，置冰浴中冷却0.5～1.5min；（2）制片的方法为：用0～20μL移液枪取预处理后的b型流感嗜血杆菌发酵液4～6μL滴于载玻片左上角，并取4～6μL绘图墨水滴于载玻片左下角，使b型流感嗜血杆菌发酵液与绘图墨水混合均匀；（3）涂片的方法为：取干净的盖玻片，与并使之与载玻片成45°角，然后将混合物由左侧刮至右侧；（4）染色前需进行一次干燥，染色后进行二次干燥，所述一次干燥的方法为：将涂片后的载玻片放置于空气中自然晾干；二次干燥的方法为：染色后，用吸水纸吸干载玻片周围的水分，然后将载玻片晾干。