摘要 |
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania koniugatu doksorubicyny z transferyną o ogólnym wzorze 1, w którym n oznacza liczbę całkowitą w granicach od 650 do 700, R oznacza resztę aminokwasową, przez wymieszanie doksorubicyny w postaci wodnego roztworu z aldehydem glutarowym w postaci roztworu w buforze kwasu HEPES/NaCl, w stosunku objętościowym 1:2. Następnie stopniowe dodawanie do otrzymanej mieszaniny zawierającej połączenie doksorubicyny z aldehydem glutarowym, transferyny o ogólnym wzorze 3, w którym n i R mają wyżej podane znaczenie, w postaci roztworu w wodzie destylowanej w ilości odpowiadającej stosunkowi objętościowemu 1:1 w odniesieniu do użytego uprzednio roztworu doksorubicyny, po czym dodanie do uzyskanej mieszaniny roztworu etanoloaminy w buforze HEPES/NaCl w ilości odpowiadającej stosunkowi objętościowemu 0,5:1 w odniesieniu do użytego uprzednio roztworu doksorubicyny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zawierającą koniugat o ogólnym wzorze 1 poddaje się dializie wobec buforu HEPES/NaCl, po czym dializat wiruje się, a otrzymany supernatant oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej, przy jednoczesnym spektrofotometrycznym monitorowaniu uzyskanych frakcji, zbierając frakcje o najwyższym stężeniu koniugatu 50-65 µmol/dm3. |