一种利用酒精工业黄水生产枯草芽孢杆菌制剂的方法

摘要

一种利用酒精工业黄水生产枯草芽孢杆菌制剂的方法，包括酒精工业黄水的收集处理、枯草芽孢杆菌在酒精工业黄水中的培养以及枯草芽孢杆菌的收取和制备。本发明所提供的利用酒精工业黄水生产枯草芽孢杆菌的方法，既能充分利用酒精工业黄水，降低黄水的处理成本，优化黄水的综合利用，改善生态环境，又能扩大现有枯草芽孢杆菌制剂生产中营养基质的来源，降低生产成本，扩大枯草芽孢杆菌的应用范围。

主权项

一种利用酒精工业黄水生产枯草芽孢杆菌制剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将收集到的酒精工业黄水放入密封的容器中，取样进行营养成分的测定，并根据测定值对所收集的酒精工业黄水进行营养成分补充，备用；（2）对经步骤（1）营养成分补充后所得的酒精工业黄水进行灭菌，并将灭菌后的酒精工业黄水的pH调节至7.2~7.5，备用；（3）将枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养至稳定生产期，检测活菌数不低于1×10⁹ cfu/mL作为种子菌液，备用；（4）将步骤（3）中所得到种子菌液按照6%~8%（v/v）的比例接种于步骤（2）处理所得的酒精工业黄水中，并于36℃~36.5℃的培养温度下，在恒温振荡器上培养16h~18h，得到枯草芽孢杆菌菌液，备用；（5）在步骤（4）中得到的枯草芽孢杆菌菌液中添加氯化钙，其添加的量按照重量体积比（w/v）为0.05%~0.08%，然后在60℃水浴中加热15min~20min，再转入80℃水浴加热5min~10min，得到含有芽胞的菌液；（6）将步骤（5）中含有芽孢的菌液用离心机进行离心处理，弃去上清液，获得枯草芽孢杆菌固体物；（7）按照步骤（6）所得的枯草芽孢杆菌固体物与载体1:4~6的重量比例，添加碳酸钙粉载体，并混合均匀，制成枯草芽孢杆菌固体混合物；（8）将步骤（7）中得到的枯草芽孢杆菌固体混合物在无菌条件下烘干，其烘干温度为60℃~65℃，然后将烘干后的枯草芽孢杆菌固体混合物研磨成干粉；（9）在步骤（8）得到的干粉中加入赋形剂，混合均匀，制成枯草芽孢杆菌制剂，并真空包装。