一种JAK2基因位点分型检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种JAK2基因位点分型检测试剂盒，其包括下列组件：1）PCR试剂：包括一对PCR正向引物SEQ ID NO:1和反向引物SEQ ID NO:2、双蒸水、Taq聚合酶，聚合酶缓冲液、dNTP与MgCl₂；2）LDR试剂：包括荧光标记探针SEQ ID NO:3、一对检测探针SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5、双蒸水、Taq连接酶和连接酶缓冲液；3）标准品：野生型质粒DNA。本发明的检测试剂盒采用PCR关联LDR方法进行检测，具有结果可靠稳定、操作简单、快速的特点，简化了传统的PCR测序检测方法中，产物纯化和沉淀等繁琐步骤，减少检测时间，有较大的临床应用价值。

主权项

一种JAK2基因位点分型检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括下列组件：1）PCR试剂：包括一对PCR正向引物SEQ ID NO:1和反向引物SEQ ID NO:2、双蒸水、Taq聚合酶、聚合酶缓冲液、dNTP与MgCl₂；其中，所用的一对PCR引物的序列如下所示：正向引物 SEQ ID NO:1：5’‑AGCAAGCTTTCTCACAAGCA‑3’；反向引物 SEQ ID NO:2：5’‑CTGACACCTAGCTGTGATCCTG‑3’；2）LDR试剂：包括荧光标记探针SEQ ID NO:3、一对检测探针SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5、双蒸水、Taq连接酶和连接酶缓冲液；其中，荧光标记探针和检测探针的序列分别为：荧光标记探针SEQ ID NO:3：5’‑TCTGTGGAGACGAGAGTAAGTAAAATACCTACCTACCTACCTAC‑3’；检测探针SEQ ID NO:4：5’‑CCTACCTACCTACCTACCTTGGTTTTAAATTATGGAGTATGTG‑3’；检测探针SEQ ID NO:5：5’‑TACCTACCTACCTACCTACCTTGGTTTTAAATTATGGAGTATGTT‑3’；3）标准品：野生型质粒DNA。