一种赖草属植物根尖染色体制片方法

摘要

本发明涉及一种赖草属植物根尖染色体制片方法，该方法包括以下步骤：⑴取材：赖草种子恒温萌发后5~7日，取生长旺盛的盆栽赖草的白色新根并将其放入离心管中；⑵装有根尖的离心管置于高压容器装置内，通N₂O进行预处理，得预处理后的新根；⑶预处理后的新根吸干水分，用卡诺氏液固定，得固定后的新根；⑷固定后的新根漂洗、吸干后用冰乙酸解离，得解离后的新根；⑸将解离后的新根中的水分吸干后置于载玻片上，制作压片；⑹将压片置于光学显微镜下观察，选择染色体分散、清晰的细胞进行照相，以便进行荧光原位杂交，最后用玻璃刀做好盖玻片位置的标记，将做好的片子放入-80℃的冰箱保存即可。本发明高效、安全。

主权项

一种赖草属植物根尖染色体制片方法，包括以下步骤：⑴取材：赖草种子在25℃恒温条件下萌发后5~7日，取生长旺盛的盆栽赖草的白色新根1.5~2cm，并将其放入一个敞口的1.5mL的内壁附着水分的离心管中；⑵在25~27℃条件下，将所述步骤⑴中装有根尖的离心管置于高压容器装置内，通入0.4~0.8MPa N₂O进行预处理，3~3.5h后即得预处理后的新根；⑶将所述预处理后的新根用滤纸吸干水分，采用卡诺氏液固定20~24h，得到固定后的新根；⑷将所述固定后的新根用蒸馏水漂洗3次，吸干水分后在体积浓度为45%的冰乙酸中解离2~10min，得到解离后的新根；⑸将所述解离后的新根中的水分吸干后置于载玻片上，用干净的刀片去掉根尖的最前端的根冠区0.5~1.5mm，取分生区0.5~1.5mm的长度，加一滴体积浓度为45%的冰乙酸，盖上盖玻片，盖玻片的一侧垫一薄刀片，用镊子的基部轻轻敲击盖玻片，使组织成为一薄层，取走所述薄刀片，然后在酒精灯的火焰上烘烤至微热，在所述盖玻片上加一吸水纸，用拇指挤压所述盖玻片使细胞充分分散，得到压片；⑹将所述压片置于光学显微镜下观察，选择染色体分散、清晰的细胞进行照相，以便进行荧光原位杂交，最后用玻璃刀做好盖玻片位置的标记，将做好的片子放入‑80℃的冰箱保存即可。