一种手足口病单、双价灭活疫苗及其制备方法

摘要

本发明公开了一种可预防手足口病的肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(Cox.A16)的手足口病单、双价灭活疫苗及其制备方法，该疫苗首先选育了手足口病疫苗株；建立并检定疫苗株三级种子批库；培养细胞；接种并增殖病毒；收集病毒悬液；灭活病毒；超滤浓缩并纯化病毒悬液，得疫苗原液；最终配制成单、双价灭活疫苗。本发明单、双价灭活疫苗在预防手足口病方面具有较好的应用前景。

主权项

一种预防手足口病的单价或双价灭活疫苗的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：a,选育手足口病疫苗株；b,建立并检定疫苗株三级种子批库；c,培养细胞；d,在细胞长成致密单层或微载体培养细胞成合适密度时，接种病毒；e,在细胞中增殖病毒；f,收集细胞所产生的病毒悬液，澄清过滤，去除细胞残渣；g,用灭活剂灭活病毒；h,超滤浓缩后的病毒悬液，通过凝胶过滤层析和离子交换层析纯化病毒液，或者通过蔗糖密度梯度离心纯化病毒液，得纯化的病毒原液，即抗原；i,配制及检定单、双价灭活疫苗半成品及成品，测量疫苗的安全性、有效性及稳定性;该单价灭活疫苗由Cox.A16抗原与Al（OH）₃佐剂按下述重量比配制而成：Cox.A16抗原              0.0015‑0.002重量份Al（OH）₃佐剂            0.25‑0.5重量份；该双价灭活疫苗由EV71抗原和Cox.A16抗原与Al（OH）₃佐剂按下述重量比配制而成：EV71抗原和Cox.A16抗原    共0.0015‑0.002重量份Al（OH）₃佐剂            0.25‑0.5重量份；其中EV71抗原和Cox.A16抗原的比例为1：1。