甲型H7N9流感病毒检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种甲型H7N9流感病毒检测试剂盒及检测方法，是分别选取H7N9禽流感病毒MP、HA、NA、NP基因设计特异性引物和探针，在样本RNA核酸纯化之后采用荧光RT-PCR技术对病毒RNA进行定性检测，以达到对流感病毒的确认、初步分型以及是否H7N9型的最终确定。本发明的试剂盒以及其检测方法，操作简单，出结果快，检测结果准确，为甲型H7N9禽流感病毒快速检测提供了可行手段，具有积极的社会价值。

主权项

一种甲型H7N9流感病毒检测试剂盒，包括特异性引物和探针，所用引物和探针核苷酸序列如下：甲型流感病毒通用型检测体系（5’‑3’）：Infa‑F1(W)：CGATCCTGTCACCTCTGACTAAG，Infa‑R1(W)：AGGGCATTTTGGCAAAGC，Infa‑FP1(W)：FAM‑TGCCCAGTGAGCGAGGACTGC‑BHQ1，RnaseP‑F1：CGCGGACAATGGCACTC，RnaseP‑R1：CGCACCAGCTCTTCCTCA，RnaseP‑FP1：HEX‑ATGTCACTCTTCACAGTCAGCGGC‑BHQ1；H7检测体系：rH7(S)‑F5：CATTCCGACAAATGCAGACAA，rH7(S)‑R5：CACTCCTCTTTCAGTTAATGTGTTTACTTT，rH7(S)‑FP5：FAM‑ATCTGCCTCGGACATCATGCTGTGTC‑BHQ1，RnaseP‑F1：CGCGGACAATGGCACTC，RnaseP‑R1：CGCACCAGCTCTTCCTCA，RnaseP‑FP1：HEX‑ATGTCACTCTTCACAGTCAGCGGC‑BHQ1；N9检测体系：rH7N9(S)‑F5：CAGAAGGCCTGTTGCAGAAAT，rH7N9(S)‑R5：TGGCAYACACATTCAGATTCCT，rH7N9(S)‑FP5：FAM‑AACACATGGGCCCGAAACATACTAAGAACA‑BHQ1，RnaseP‑F1：CGCGGACAATGGCACTC，RnaseP‑R1：CGCACCAGCTCTTCCTCA，RnaseP‑FP1：HEX‑ATGTCACTCTTCACAGTCAGCGGC‑BHQ1；NP（2013）检测体系：H7N9(NP)‑F1：GAGGGAACACCAACCAACAGA，H7N9(NP)‑R1：GCCATAATGGTTGCTCTTTCG，H7N9(NP)‑FP1：FAM‑CAGGTCAGCGTTCAACCCACTTTCTCAG‑BHQ1，RnaseP‑F1：CGCGGACAATGGCACTC，RnaseP‑R1：CGCACCAGCTCTTCCTCA，RnaseP‑FP1：HEX‑ATGTCACTCTTCACAGTCAGCGGC‑BHQ1。