一种单核苷酸多态性分析方法

摘要

本发明涉及一种单核苷酸多态性分析方法。揭示了一种测定已知单核苷酸多态性的新方法；针对待测基因模板，设计特异性引物分别向两个不同的方向扩增，控制另外两条分别与特异性引物配对的外围引物扩增效率，使整个PCR反应体系在野生型或者纯合突变型标本检测时只有一种型特异性PCR产物，在杂合标本检测时有两种PCR产物，明确区分野生型/杂合型/突变型。本发明为临床检测提供了一种结果稳定、重复性好、适用机型广的SNP分析方法。

主权项

一种基于等位基因特异性扩增的SNP检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)以待测基因为模板，以针对SNP位点的特异性引物以及与特异性引物配对的外围引物为引物，以Taq DNA聚合酶进行PCR扩增；其中，所述的针对SNP位点的特异性引物包括：针对野生型等位基因位点的内引物1，以其3’末端碱基起算第1‑3位的碱基与野生型SNP位点碱基匹配；针对突变型等位基因位点的内引物2，以其3’末端碱基起算第1‑3位的碱基与突变型SNP位点碱基匹配而；所述的外围引物是远离SNP位点的引物，包括：与内引物1构成引物对的外围引物1，与内引物2构成引物对的外围引物2；并且，控制外围引物1和外围引物2的扩增效率使之比内引物1和内引物2的扩增效率低；使外围引物1和外围引物2之间不形成扩增产物；(2)分析PCR扩增产物，确定待测样品中待测基因的SNP类型。