一种从豆渣中制备高活性纤溶酶的方法

摘要

一种从豆渣中制备高活性纤溶酶的方法属于生物化学领域，该方法包括以下步骤：(1)将豆渣干燥后进行超微粉碎；(2)将超微粉碎后的豆渣进行水分调节，然后进行灭菌，冷却后接入黑曲霉与米曲霉进行固态发酵得发酵产物；(3)将发酵产物分散于生理盐水中进行超声辅助浸提，浸提后离心分离得上清液；(4)将上清液进行硫酸铵盐析，盐析后进行透析浓缩、阴离子交换层析和凝胶过滤层析，层析后进行真空浓缩、冷冻干燥即得纤溶酶；本方法操作简单、成本低、生产效率高，制备的纤溶酶为单一组分，表观分子量为30KDa，是一种典型的丝氨酸蛋白酶，且该纤溶酶活性强、纯度高。

主权项

一种从豆渣中制备高活性纤溶酶的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将豆渣干燥后用QLM扁平式超音速气流粉碎系统进行超微粉碎，所述的进料气流为0.6MPa，粉碎气流为0.6MPa；(2)将超微粉碎后的豆渣进行水分调节，然后进行灭菌，冷却后接入黑曲霉与米曲霉进行固态发酵得发酵产物，所述的黑曲霉接种量为豆渣质量的6％，米曲霉接种量为豆渣质量的8％，发酵温度为32℃，发酵pH为7.5，发酵时间为10‑40h；(3)将发酵产物分散于生理盐水中进行超声辅助浸提，所述的超声功率为20‑100W，浸提温度为20‑40℃，浸提时间为1‑5h，浸提后离心分离得上清液；(4)将上清液进行硫酸铵盐析，所述的硫酸铵饱和度为30‑80％，盐析后进行透析浓缩、DEAE‑Sepharose FastFlow阴离子交换层析和Sephadex G‑75凝胶过滤层析，层析后进行真空浓缩、冷冻干燥即得纤溶酶。