板式化学发光免疫诊断试剂通用固相包被板及其制备方法

摘要

本发明公开了一种板式化学发光免疫诊断试剂通用固相包被板的制备方法，该方法可以使不同的检测试剂用同一种通用包被板，该通用包被板可以与链亲和素和荧光素结合。然后在不同的检测项目的包被抗体上标记上生物素或者荧光素，间接的将包被抗体固定在通用包被板上。采用此发明前的包被板随着项目不同而需要单独生产，或者生物素标记成功率低，或者荧光素结合速率慢，分别有各自的缺点。采用本发明后能最大限度的提高标记成功率以及结合速率，还可以通用包被板，提高生产和应用简便性。

主权项

一种板式化学发光免疫诊断试剂通用固相包被板的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1：取0.5～1.5mg分子量66KDa的链亲和素和2.0～2.8mg分子量160KDa的抗荧光素抗体溶解于0.05～0.15ml、0.05M、pH9.6的碳酸缓冲液中，加入搅拌子备用；步骤2：取70％的戊二醛0.05～0.15ml用蒸馏水稀释70倍成0.5～1.5％浓度备用；步骤3：在步骤1制得的溶液中加入新鲜配制的1％戊二醛溶液0.05～0.15ml，室温搅拌1小时。取出反应液加入透析袋，对0.05M、pH9.6的碳酸缓冲液透析过夜，期间换液3次；要求透析袋透过直径为160KDa；将透析后的反应液加入等量甘油保存于‑15～25℃；步骤4：将新合成的包被蛋白甘油溶液用0.05M、pH9.6的碳酸缓冲液稀释到1∶1000，在96孔化学发光板中每孔加入50～150μl稀释溶液，3～5℃静置过夜；次日将板子拍杆，加入含有1％牛血清白蛋白的溶液150～250μl，37℃封闭反应0.5～1.5小时；将板子再次拍干，置于烘干间抽湿烘干后真空包装，得到板式化学发光免疫诊断试剂通用固相包被板。