发明名称 | 一种鉴定鲤鱼基因拷贝数的方法 | ||
摘要 | 本发明公布了一种鉴定鲤鱼基因拷贝数的方法,包括以下步骤:(1)提取鲤鱼总DNA;(2)选取已知的鲤鱼单、双拷贝基因作为对照基因,设计其定量PCR引物,并设计目的基因的定量PCR引物;(3)以鲤鱼总DNA为模板,以单、双拷贝对照基因引物和目的基因的定量PCR引物为引物进行实时定量PCR;(4)比较目的基因和对照基因的扩增曲线,确定目的基因的拷贝数。运用本发明所述的方法,可以在分子水平快速准确地鉴定目的基因的单双拷贝数,为鲤鱼染色体间遗传物质交流或分子育种等研究提供直接、有效的分子证据。 | ||
申请公布号 | CN103103254B | 申请公布日期 | 2014.08.20 |
申请号 | CN201210440095.X | 申请日期 | 2012.11.07 |
申请人 | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 | 发明人 | 李红霞;俞菊华;李建林;唐永凯 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人 | 楼高潮 |
主权项 | 一种鉴定鲤鱼基因拷贝数的方法,包括以下步骤:(1)提取鲤鱼总DNA;(2)选取已知的鲤鱼单、双拷贝基因作为对照基因,设计其定量PCR引物,并设计目的基因的定量PCR引物;(3)以鲤鱼总DNA为模板,以单、双拷贝对照基因引物和目的基因的定量PCR引物为引物进行实时定量PCR;(4)比较目的基因和对照基因的扩增曲线,若目的基因的扩增曲线与单拷贝对照基因的扩增曲线基本重合,则为单拷贝基因;若目的基因的扩增曲线与双拷贝对照基因的扩增曲线基本重合,则为双拷贝基因;其特征在于:所述步骤(2)中,所述对照基因为MSTN,其单拷贝定量PCR引物为:M2aF:CCACAGAACGTAAGTACCAAGATGC,M2aR:GCTGAATGAATGAACCACTATTGTGG;其双拷贝定量PCR引物为M2sF:GCATCTGTGACGACTGGAGACGAC,M2sR:GATGGTCTCACTGCTGCCTTGTTC。 | ||
地址 | 214081 江苏省无锡市山水东路9号 |