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Métodos para mejorar la eficacia de las etapas de la cromatografía descendente para la purificación de proteínas que comprende: (a) pasar una composición que comprende un polipéptido de interés y diversos contaminantes a través de una membrana de intercambio iónico, en donde el polipéptido y la membrana tienen carga opuesta, en condiciones operativas compuestas por un tampón que tiene un pH lo suficientemente diferente del pI del polipéptido como para mejorar la carga del polipéptido y una fuerza iónica baja eficaz para evitar el blindaje de las cargas por los iones del tampón, lo que provoca que la membrana se una al polipéptido y al menos a un contaminante; (b) sobrecargar la membrana de intercambio iónico de modo que al menos un contaminante permanezca unido a la membrana mientras el polipéptido de interés se encuentra principalmente en el efluente; (c) recolectar el efluente de la membrana de intercambio iónico que comprende el polipéptido de interés; (d) someter el efluente de la membrana que comprende el polipéptido de interés a una etapa de purificación de carga similar a la membrana anterior; y (e) recuperar el polipéptido purificado del efluente de la etapa de purificación por cromatografía de intercambio iónico cargada. |
