检测猪唾液中猪瘟病毒特异性抗体的方法

摘要

本发明公开了一种检测猪唾液中猪瘟病毒特异性抗体的方法。方法步骤为：1）猪瘟全病毒抗原的制备、灭活和96孔聚苯乙烯反应板包被；2）利用悬挂棉绳法，采集唾液，处理后获得唾液一抗；3）将唾液一抗，按编号加入抗原包被的反应板上，22-28℃饱和湿度反应1小时，洗涤；4）将辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG-FC抗体，按顺序加入到反应板上，22-28℃饱和湿度避光反应30分钟，洗涤；5）将TMB显色剂A液和B液1:1混合后，按顺序加入到反应板上，避光反应15分钟，加入终止液；6）放入酶标仪中，读取OD650数据，判定结果。本发明避免了单个动物采血的问题，适用于猪群大面积的猪瘟抗体调查。

主权项

一种检测猪唾液中猪瘟病毒特异性抗体的方法，其特征在于包括如下步骤：1）猪瘟全病毒抗原的制备、灭活和抗原包被96孔聚苯乙烯反应板； 2）利用悬挂棉绳法，诱导动物咀嚼，采集唾液，处理后获得唾液一抗，保存备用；3）将唾液一抗，以PBST溶液1:1稀释后，按编号加入抗原包被的96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加100ul，22‑28℃饱和湿度反应1小时，洗涤备用；4）将辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG‑FC抗体，以 PBST溶液1:2000稀释后，按顺序加入到96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加100ul，22‑28℃饱和湿度避光反应30分钟，以PBST洗涤备用；5）将TMB显色剂 A液和B液1:1混合后，按顺序加入到96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加50ul，避光反应15分钟，随后每个反应孔加入50ul 2M浓硫酸，终止反应；6）放入酶标仪中，读取OD650数据，判定结果。