检测猪唾液中伪狂犬病毒gE蛋白特异性抗体的方法

摘要

本发明公开了一种检测猪唾液中伪狂犬病毒gE蛋白特异性抗体的方法。方法步骤为：1）利用悬挂棉绳法，采集唾液，处理后获得唾液一抗；2）将唾液一抗，按编号加入抗原包被的反应板上，18-25℃饱和湿度反应1小时，洗涤；3）将辣根过氧化物酶标记的羊抗伪狂犬病毒gE蛋白IgG，按顺序加入到反应板上，18-25℃饱和湿度避光反应30分钟，洗涤；4）将TMB显色剂A液和B液1:1混合后，按顺序加入到反应板上，避光反应15分钟，加入终止液；5）放入酶标仪中，读取OD650数据，判定结果。本发明避免了单个动物采血的问题，适用于猪群大面积的伪狂犬病毒gE蛋白抗体调查。

主权项

一种检测猪唾液中伪狂犬病毒gE蛋白特异性抗体的方法，其特征在于包括如下步骤：1）利用悬挂棉绳法，诱导动物咀嚼，采集唾液，处理后获得唾液一抗；2）将唾液一抗，以PBST溶液1:1稀释后，按编号加入伪狂犬病毒gE抗原包被的96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加150ul，18‑25℃饱和湿度反应1小时, 以PBST洗涤3次；3）将辣根过氧化物酶标记的羊抗伪狂犬病毒gE蛋白IgG，以 PBST溶液1:1500稀释后，按顺序加入到96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加100ul，18‑25℃饱和湿度避光反应30分钟，以PBST洗涤3次；4）将5%的二甲氧联苯胺显色剂，按顺序加入到96孔聚苯乙烯反应板的反应孔中，每个反应孔加50ul，避光反应15分钟，随后每个反应孔加入50ul 2M浓硫酸；5）放入酶标仪中，读取OD650数据，判定结果。