一种抗水稻秧苗立枯病的微生物肥料及其制备方法

摘要

本发明公开了一种水稻秧苗立枯病的微生物肥料及其制备方法。本发明首先通过鹤羽田戴尔福特菌、侧孢芽胞杆菌、多粘类芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌和肺炎克雷伯氏菌菌种分别发酵制得菌液，然后将其混合制得混合发酵菌液；最后在有机物料中加入混合肥料、混合发酵菌液和无菌水，发酵，发酵结束后，将发酵后肥料与腐殖酸、草炭混匀，经对辊挤压式造粒机制备抗水稻秧苗立枯病的微生物肥料。本发明的抗水稻秧苗立枯病的微生物肥料能有效降低水稻旱育秧立枯病的发生，还能降低病原菌对水稻秧苗生长的抑制作用，显著地促进水稻秧苗的生长。

主权项

一种抗水稻秧苗立枯病的微生物肥料的制备方法，其特征是，其步骤如下：(1)鹤羽田戴尔福特菌的发酵将在LB固体培养基上活化的鹤羽田戴尔福特菌菌株单菌落，在超净工作台上转接到装有10mL牛肉膏蛋白胨液体培养基的容积为50mL的三角瓶中，于30℃、180rpm条件下振荡培养20h；将培养后得到的培养液接种于装有400mL牛肉膏蛋白胨培养基的容积为1000mL的三角瓶中，180rpm、30℃条件下振荡培养20h后接种于装有20L发酵培养基的机械搅拌式发酵罐中，发酵条件设定为：溶氧100％，搅拌速度350rpm，发酵温度30℃，发酵时间48h，pH6.8‑7.2；发酵到达终点后，取样检测活芽孢浓度，确保活芽孢浓度≥1.0×10⁸cfu/mL；(2)侧孢芽胞杆菌、多粘类芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌和肺炎克雷伯氏菌的发酵将在LB固体培养基上分别活化的侧孢芽胞杆菌、多粘类芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌或肺炎克雷伯氏菌菌株单菌落，在超净工作台上转接到装有10mLLB液体培养基的容积为50mL的三角瓶中，于30℃、180rpm条件下振荡培养20h；将培养后得到的培养液接种于装有400mL牛肉膏蛋白胨培养基的容积为1000mL的三角瓶中，180rpm、30℃条件下振荡培养20h后接种于装有20L发酵培养基的机械搅拌式发酵罐中，发酵条件设定为：溶氧100％，搅拌速度350rpm，发酵温度30℃，发酵时间48h，pH6.8‑7.2；发酵到达终点后，取样检测活芽孢浓度，确保活芽孢浓度≥1.0×10⁸cfu/mL；(3)混合发酵菌液的制备将(1)、(2)中发酵得到的鹤羽田戴尔福特菌、侧孢芽胞杆菌、多粘类芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌和肺炎克雷伯氏菌按照体积比2:1:1:1:1混合，制得混合发酵菌液；(4)微生物肥料的制备将菜籽饼、大豆饼按照重量比1:1混匀作为有机物料，添加氮磷钾肥按照纯氮：纯磷：纯钾重量比为3:1:1混匀作为混合肥料，将有机物料中加入混合肥料，混匀后添加混合发酵菌液，同时添加无菌水，在发酵罐中发酵1周；发酵结束后，将发酵后的肥料与腐殖酸、草炭混匀，经对辊挤压式造粒机制备抗水稻秧苗立枯病的微生物肥料，并检测微生物肥料的活芽孢、有机质和水分含量，使活芽孢含量≥1.0×10⁸cfu/g，有机质含量≥60％，水份含量控制在8‑10％之间，检验合格后包装。