一种利拉鲁肽的全固相合成方法

摘要

本发明公开了一种利拉鲁肽的全固相合成方法，以2-Cl-TrtResin为固相载体，以DIC/HOBt为缩合剂，经过微波反应技术的处理，缩短了反应时间，提高了缩合效率。侧链修饰采用新颖ivDde侧链保护的赖氨酸，进行侧链修饰合成，期间采用20%哌啶脱Fmoc保护，直至直链多肽合成完毕。其次采用水合肼脱ivDde保护后，进行侧链修饰反应。得到的在固相载体上的全保护利拉鲁肽通过三氟醋酸的处理得到利拉鲁肽粗品，并经过C18柱的纯化冻干，得到纯品利拉鲁肽，经过强阴离子转盐并冻干后得到醋酸利拉鲁肽醋酸盐。本发明操作简单，合成周期短，生产成本低，副产物少，产品收率高，利于大规模生产。

主权项

一种利拉鲁肽的全固相合成方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）以2‑Cl‑Trt树脂为固相载体，与Fmoc‑Gly‑OH缩合反应获得Fmoc‑Gly‑2‑Cl‑Trt树脂；（2）通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽序依次缩合具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中赖氨酸采用Fmoc‑Lys（ivDde)‑OH，每次缩合反应30‑35min后，再在微波条件下反应处理；（3）脱除赖氨酸侧链保护基ivDde；（4）通过固相合成法，在赖氨酸侧链偶联Fmoc‑Glu‑OtBu，并在谷氨酸上连接棕榈酸；（5）裂解，脱除保护基和树脂得到利拉鲁肽粗肽；（6）纯化，冻干，转盐，冻干，得到利拉鲁肽醋酸盐；步骤（2）中，缩合反应时，具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸用量为：氨基酸的摩尔数：树脂取代度=2:1；微波条件下反应具体为：微波输出功率130w‑195w，反应15‑20s；步骤（3）采用水合肼溶液脱除ivDde，水合肼溶液用量为3‑4倍树脂体积，水合肼溶液体积配比为：水合肼：DMF=1:15‑20；步骤（6）所述转盐具体为：将50‑60mg冻干的利拉鲁肽粗肽溶解在6‑7ml体积分数为0.1‑0.2%的醋酸水溶液中，然后加入到250‑300mg强阴离子树脂中，磁力搅拌器上室温下反应1‑1.5小时，过滤，收集滤液，树脂用1‑2ml体积分数为0.1‑0.2%醋酸水溶液洗涤2次，收集洗脱液，与滤液合并。