一种鹅突变型OAZ1基因真核表达载体的构建方法

摘要

本发明公开了一种鹅突变型OAZ1基因真核表达载体的构建方法。步骤为：应用定点突变技术，设计引物P3、P4和P5、P6，PCR扩增获得缺失掉+175位碱基的鹅突变型OAZ1基因；设计引物P7和P8，PCR扩增获得5'端含有kozak序列的鹅突变型OAZ1基因；酶切含有kozak序列的突变型OAZ1基因及pEGFP-N1骨架载体，连接酶切产物，转化至E. coli DH5α中，获得突变型OAZ1基因的真核表达载体。应用本发明可快速获得+175位碱基缺失的突变型OAZ1基因，并可构建突变型OAZ1基因的真核表达载体，使OAZ1表达不再受细胞内游离多胺调控而直接表达全长功能蛋白质。

主权项

一种鹅突变型OAZ1基因真核表达载体的构建方法，其特征在于，定点缺失鹅OAZ1基因CDS区+175位碱基以及用于定点突变的引物设计为：P3（TGGTGCTCCGATGTCCCTCACC）、P4（GGATCTTCCAGAGATTGAGCTCATGGTGAAATCCTCCCTGC）、P5（TGAGGGACATCGGAGCACCACCG）和P6（CTGCCGTTCGACGATTAAGCTTCTATTCTTCTTCTGATGTCTC）。