一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法

摘要

本发明涉及一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法。通过对地骨皮甲醇提取物，连续进行硅胶柱层析，聚苯乙烯小孔树脂粗分离与反相C₁₈硅胶柱层析精制，冷冻干燥后制得四种环肽类化合物。采用石油醚、氯仿提取的两步非常关键，因为除去了油脂成分与弱极性成分，实现了按化合物极性初步分离的目的。此外采用固液萃取（固液回流提取）的方法得到含有环肽类的甲醇提取物，固液萃取方法的最大优点在于分离速度快，便于机械化连续操作，避免了液液萃取方法中静置时间长，容易产生乳化现象的缺点，制备得到的环肽类化合物纯度高，具有对血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）与血管紧张肽原酶（renin）的抑制作用，还可用于制备治疗糖尿病或者降血糖的药物。

主权项

一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）对洗净晾干的地骨皮粉碎后，按照体积质量比2～3mL/g地骨皮加入30～60℃沸程石油醚，55～65℃水浴加热连续回流提取2～3次，回流时间4～5小时；石油醚提取后的地骨皮残渣置于通风处或者真空干燥器中除尽石油醚，然后按照体积质量比2～3mL/g地骨皮残渣加入氯仿或二氯甲烷，65～75℃水浴加热连续回流提取2～3次，回流时间4～5小时，氯仿或二氯甲烷提取后的地骨皮残渣置于通风处或真空干燥器中除尽氯仿或二氯甲烷，然后按照体积质量比2～3mL/g地骨皮残渣加入甲醇，65～75℃水浴加热连续回流提取2～3次，回流时间4～5小时，合并提取液，回收溶剂，回收溶剂后得浸膏，此为地骨皮甲醇提取物；（2）对甲醇提取物进行柱层析分离制备，具体过程如下：运用硅胶柱层析，上样后以氯仿:甲醇:水=70:30:5为洗脱液淋洗，收集第15～20倍柱体积的馏分，于40～50℃下减压浓缩，蒸干备用；然后利用聚苯乙烯基小孔树脂柱层析粗分离，上样后以甲醇:水体系梯度洗脱，甲醇从40%到100%变化，梯度间隔10%，每个梯度使用4倍柱体积，分别收集甲醇为40%，50%，60%与80%时的馏分，分别于40～50℃下减压浓缩，蒸干，获得粗产品1、2、3与4；最后，将获得的四种粗产品分别进行反相C₁₈硅胶柱层析精制，同样采用甲醇:水体系进行梯度洗脱，梯度间隔5%，每个梯度使用2倍柱体积，对于粗产品1收集甲醇为35%的馏分，对于粗产品2收集甲醇为40%的馏分，对于粗产品3收集甲醇为50%的馏分，对于粗产品4收集甲醇为70%的馏分，分别于40～50℃下减压浓缩，冷冻干燥后分别获得如下通式的化合物A、B、C和D；A，R₂=H，R₃=‑CH₂OH；B，R₂=H，R₃=‑CH₂OH；C，R₃=‑CH₂OH；D，R₂=H，R₃=‑CH(CH₃)CH₂CH₃。