发明名称 | 一种解脲脲原体14种血清型荧光定量PCR检测方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种解脲脲原体14种血清型荧光定量PCR检测方法,该方法14种血清型均采用20微升反应体系,其中引物和探针的终浓度均为0.2微摩尔每升(uM),镁离子终浓度染料法为2毫摩尔每升(mM),探针法为3mM,染料法加10微升qPCRMasterMix,探针法加10微升定量PCRSuperMix-UDG。本发明首次实现了用分子生物学方法对解脲脲原体的14种血清型进行分型,解决了传统分型方法灵敏度低、重复性差的缺点,为今后在血清型水平进一步研究解脲脲原体的致病性打下了方法学基础,可广泛应用于临床。 | ||
申请公布号 | CN103966315A | 申请公布日期 | 2014.08.06 |
申请号 | CN201410113941.6 | 申请日期 | 2014.03.25 |
申请人 | 浙江大学 | 发明人 | 谢鑫友;张钧;宋铁军;黄珺 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人 | 周烽 |
主权项 | 一种解脲脲原体14种血清型荧光定量PCR检测方法,其特征在于,该方法包括:(1)14种血清型均采用20微升反应体系,其中引物和探针的终浓度均为0.2微摩尔每升(uM),镁离子终浓度染料法为2毫摩尔每升(mM),探针法为3mM,染料法加10微升qPCR Master Mix,探针法加10微升定量PCR SuperMix‑UDG;引物和标记探针如下:血清型 引物、探针 序列(5’—3’)<tables num="0001" id="ctbl0001"><img file="FDA0000481579470000011.GIF" wi="1876" he="2157" /></tables>(2)荧光定量PCR检测解脲脲原体14种血清型扩增条件:<tables num="0002" id="ctbl0002"><img file="FDA0000481579470000021.GIF" wi="2078" he="1076" /></tables> | ||
地址 | 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号 |