主权项 |
一种检测肾上腺激素含量的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)工作曲线的制作:配制1~300 ng/ml肾上腺激素混合标准溶液,注入高效液相色谱进行分析,制作工作曲线,得到肾上腺激素的检测限和线性回归方程;(2)样品处理:在待测生物样品中加入1~2ml乙腈、0.1~0.5g氯化钠、0.1~0.5g氯化锌、0.1~0.5g醋酸钠、0.1~0.5g硫酸镁试剂中一种,混匀,在转速5000~12000r/min下离心10~20min,取出上清液,用pH 5.5~8.0的磷酸二氢钾‑磷酸氢二钾缓冲溶液稀释至5ml,备用;(3)分散液液微萃取:将100~300μl萃取剂,0.5~1.0ml质量体积百分比浓度为5%的衍生剂水杨醛水溶液和0.5~1.0 ml体积百分比浓度为0.05~0.1%的分散剂水溶液混匀,立即加入备用样品中,超声,形成乳浊体系,然后在3000~8000 r/min下离心2~10 min;(4)样品测定:吸取步骤(3)中离心管底部的有机相,过滤,在与步骤(1)相同色谱条件进行HPLC分析,并对照步骤(1)所得的线性回归方程,计算出样品中肾上腺激素的含量;其中所述色谱条件为以乙腈‑质量百分比为0.1%的甲酸溶液作为流动相,梯度洗脱为质量百分比浓度80%乙腈洗脱第0~3 min,质量百分比浓度80%~90%乙腈洗脱第3~6.5 min,质量百分比浓度90%乙腈洗脱第6.5~8 min;所述萃取剂为二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳中一种;肾上腺激素为地塞米松、曲安奈德、丙酸倍率米松、丁酸氢化可的松、苯丙酸诺龙、泼尼松、醋酸可的松、甲基泼尼松龙中一种或几种。 |