发明名称 | 基于免疫磁酶的检测伏马毒素B1的方法 | ||
摘要 | 本发明涉及一种检测伏马毒素B1的方法,包括以下步骤:将FB1半抗原与OVA偶联,得到偶联物FB1-OVA;将抗FB1单克隆抗体与免疫磁珠结合;将抗体-磁珠结合物加入EP管中,洗涤,将待侧样品的萃取液加入上述管中,震荡;去除上清液,洗涤,将OVA-FB1加入上述管中,震荡;去除上清液,洗涤,将抗FB1单克隆抗体加入上述管中,震荡;去除上清液,洗涤,将HRP标记羊抗鼠二抗加入上述管中,震荡;去除上清液,洗涤,加入发光底物,震荡,测定发光值;制作标准曲线,再根据待测样品的发光值,通过标准曲线得到对应的FB1浓度。本发明采用抗FB1单克隆抗体,与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应,特异性强,减少了假阳性率。 | ||
申请公布号 | CN102539772B | 申请公布日期 | 2014.08.06 |
申请号 | CN201210002401.1 | 申请日期 | 2012.01.06 |
申请人 | 上海交通大学 | 发明人 | 严亚贤;王元凯;孙建和 |
分类号 | G01N33/577(2006.01)I | 主分类号 | G01N33/577(2006.01)I |
代理机构 | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人 | 郭国中 |
主权项 | 一种基于免疫磁酶检测伏马毒素B1的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,将FB1半抗原与OVA偶联,得到FB1的偶联物FB1‑OVA;步骤二,将抗FB1单克隆抗体与免疫磁珠结合,得到抗体‑磁珠结合物;步骤三,将所述抗体‑磁珠结合物加入EP管中,使用洗涤液洗涤,将待测样品进行萃取,得到萃取液,该萃取液稀释后加入所述管中,震荡;步骤四,去除上清液,使用洗涤液洗涤,将所述FB1‑OVA加入所述管中,震荡;步骤五,去除上清液,使用洗涤液洗涤,将抗FB1单克隆抗体加入所述管中,震荡;步骤六,去除上清液,使用洗涤液洗涤,将HRP标记羊抗鼠二抗加入所述管中,震荡;步骤六,去除上清液,使用洗涤液洗涤,加入发光底物,震荡,测定发光值;步骤七,根据已知不同浓度FB1与抗FB1单克隆抗体加入后得到的发光值,制作标准曲线,再根据待测样品的发光值,通过标准曲线得到对应的FB1浓度。 | ||
地址 | 200240 上海市闵行区上海市东川路800号 |