一种测定人血液中甘胆酸的试剂盒

摘要

本发明公开了一种测定人血液中甘胆酸的试剂盒，包括试剂A、试剂B及已知浓度的甘胆酸校准品，其中，试剂A与试剂B质量比为1-5:1；所述试剂A的各组分为：微生物抑制剂，EDTA，甘油，牛血清白蛋白，表面活性剂，反应增强剂，氯化钠，pH6-8的Good’s缓冲液；试剂B的各组分为：微生物抑制剂，EDTA，甘油，牛血清白蛋白，表面活性剂，反应增强剂，氯化钠，pH6-8的Good’s缓冲液，与甘胆酸单克隆抗体交联的纳米微球。本发明检测操作简便、快速，可以同时进行大批量样本快速测定，检测的准确度、灵敏度好。

主权项

一种测定人血液中甘胆酸的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括试剂A、试剂B及已知浓度的甘胆酸校准品，其中，试剂A与试剂B质量比为1‑5 : 1；所述试剂A的各组分及其含量为：微生物抑制剂0.001‑1.1g/L，EDTA  0.05‑ 5.0 g/L，甘油0.1‑10.0 g/L，牛血清白蛋白0.1‑5.0g/L，表面活性剂0.01‑3.0g/L，反应增强剂0.5‑5.0g/L，氯化钠0.1‑8.0g/L，pH 6‑8 的Good’s缓冲液25‑100mmol/L；所述试剂B的各组分及其含量为：微生物抑制剂0.001‑1.1g/L，EDTA  0.05‑ 5.0 g/L，甘油0.1‑10.0 g/L，牛血清白蛋白0.1‑5.0g/L，表面活性剂0.01‑3.0g/L，反应增强剂0.5‑5.0g/L，氯化钠0.1‑8.0g/L，pH 6‑8的Good’s缓冲液25‑100mmol/L，与甘胆酸单克隆抗体交联的粒径为50‑100nm的纳米微球为0.1‑0.5 g/L，与甘胆酸单克隆抗体交联的粒径为150‑250nm的纳米微球为0.1‑0.5 g/L；与甘胆酸单克隆抗体交联的粒径为50‑100nm或150‑250nm的纳米微球由以下工艺制备而成：（1）、在离心管内分别加入200‑220µl粒径为50‑100nm或150‑250nm的纳米胶乳颗粒，1500‑1800µl  pH 7.4  0.01mol/L磷酸盐缓冲液， 甘胆酸单克隆抗体两株，每株1.0‑2mg，500‑600µl  EDAC水溶液，磁力搅拌4‑6小时， 4℃高速离心1‑2小时，弃上清液；（2）、沉淀置于冰浴中，超声振荡3‑4min；（3）、步骤（2）处理后的沉淀用等体积HEPES缓冲液重悬后加入淬灭剂0.1mol/L甘氨酸溶液500‑600µl，搅拌30‑40min；（4）、4℃高速离心1‑2小时，去掉上清液，沉淀用等体积HEPES缓冲液重悬后得与甘胆酸单克隆抗体交联的粒径为50‑100nm或150‑250nm的纳米微球。