用拉曼光谱法对待测样品中高铁血红蛋白含量MetHb%进行测定的方法

摘要

本发明公开了用拉曼光谱法对待测样品中高铁血红蛋白含量MetHb%进行测定的方法，通过确定拉曼光谱法PR-MetHb%推导算式，对待测样品进行拉曼光谱检测并得到其高铁血红蛋白含量MetHb%。本发明具有灵敏度高、结果准确、重复性好、实验步骤简单、分析速度快、试剂无污染、安全的优点，甚至样品无需进行提前处理，隔着包装即可直接进行检测，可以进行实时原位无损检测。本发明可针对无基质血红蛋白、血液代用品或血液中高铁血红蛋白含量的测定，应用前景广阔。

主权项

用拉曼光谱法对待测样品中高铁血红蛋白含量MetHb％进行测定的方法，包括以下步骤：1)针对待测样品的种类制备不同高铁血红蛋白含量的标准溶液：将质量浓度为10％的K₃Fe(CN)₆溶液以不同体积分别与待测样品混合，得到含有不同高铁血红蛋白含量的标准溶液，用已知的检测方法定值标准溶液中高铁血红蛋白的质量浓度MetHb％；2)用显微共焦拉曼光谱仪对上述含有不同高铁血红蛋白含量的标准溶液进行检测，测定范围在1200‑1300cm^‑1之间，得到含有不同高铁血红蛋白含量的标准溶液的拉曼光谱；并对该拉曼光谱进行基线校准后再曲线顺滑；3)确定拉曼光谱法的测定公式：按算式计算含有不同高铁血红蛋白含量的标准溶液的PR值,其中I₁₂₁₅为拉曼光谱在拉曼频率为1215cm^‑1处的峰强度值，I₁₂₂₇为拉曼光谱在拉曼频率为1227cm^‑1处的峰强度值；依据PR值与步骤1)定值的MetHb％值确定线性关系式PR＝k1·MetHb％+a，k1为斜率,a为截距，再反推确定拉曼光谱法PR‑MetHb％推导算式；4)按步骤2)的操作测定待测样品的拉曼光谱，并按步骤3)的操作得到待测样品的PR值，代入步骤3)确定的拉曼光谱法PR‑MetHb％推导算式，得到待测样品的MetHb％结果。