扁竹根抗糖尿病多肽的制备方法

摘要

本发明提供扁竹根抗糖尿病多肽的制备方法，首先采用磷酸缓冲液浸提,硫酸铵沉淀,离心透析,再使用凝胶色谱葡聚糖凝胶SephadexG-25柱分离纯化,得到扁竹根抗糖尿病多肽。本发明得到的扁竹根抗糖尿病多肽主要为短肽,分子量范围在265—700Da，具有较强的α‐葡萄糖苷酶抑制活性,IC₅₀达37.3±3.2µg/ml。因而，本发明得到的扁竹根抗糖尿病多肽有利于医药和其它领域的开发利用。

主权项

扁竹根抗糖尿病多肽的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：（1）称取100~500 g扁竹根粉末，用液氮研磨后加入1~4 L的缓冲液浸泡24 h，再用纱布过滤得到扁竹根的提取液，离心除去沉淀；在上清液中加入硫酸铵至质量百分比浓度为10%~80%，过夜，再离心，除去上清液，得到蛋白浸膏；用缓冲液溶解蛋白浸膏后装入截留分子量范围3000‑10000的透析袋，透析三天，然后冻干得到蛋白质粉末；（2）称取步骤（1）得到的蛋白粉末0.1~2g, 配成质量百分比浓度为0.3%~3%的扁竹根蛋白液，加入蛋白酶水解, 8~15 h后在95 ℃的水浴中灭酶10 min，冷却到室温后在8000 r/min下离心10 min, 取上清液得到酶解产物； (3) 将步骤（2）得到的酶解产物再进行凝胶色谱葡聚糖凝胶Sephadex G‑25柱层析分离纯化，得到三个洗脱峰，收集具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的第二个蛋白峰冻干保存，得到扁竹根抗糖尿病多肽。