水稻黑条矮缩病毒室内活体保存方法

摘要

本发明提供了一种水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)室内活体保存方法。本发明原理以小麦作为毒源寄主，让携带RBSDV的灰飞虱成虫在小麦幼苗上传毒、后代灰飞虱若虫从小麦上获毒，从而在室内饲养条件下短期内持续大量获得带毒灰飞虱。本方法有效克服了RBSDV室内长期大量活体保存的技术瓶颈，解决了RBSDV毒源难以连续活体保存、毒源常规获取周期长、饲毒植株难以长期提供、饲毒若虫虫龄最小化难以操作等一系列技术难题。获得的带毒灰飞虱可随时支持水稻和玉米品种抗性鉴定，亦可作为RBSDV纯化和血清制备材料，解决了常规提纯时材料获取难、病毒含量低等难题。该发明应用将大大加快RBSDV的研究、开发与利用。

主权项

一种水稻黑条矮缩病毒室内活体保存方法，其特征在于：将携带水稻黑条矮缩病毒的灰飞虱，移到长至一定程度麦苗上36‑48h，移出前述灰飞虱接入刚羽化的无毒灰飞虱雌虫若干头，36‑48h后移出接入灰飞虱，待麦苗上孵化的灰飞虱长至2龄左右移至健康水稻苗上常规饲养至5龄或成虫，即获得携带水稻黑条矮缩病毒的灰飞虱，将获得的带毒灰飞虱重复上述步骤即可连续获得灰飞虱带毒虫，实现水稻黑条矮缩病毒室内连续活体保存，该方法的关键在于：1)毒源保存程序中，麦苗为毒源寄主；2)接入麦苗灰飞虱对水稻黑条矮缩病毒的带毒率不低于25％；3)初始接入灰飞虱时麦苗苗龄为2‑4叶期；4)接入麦苗的对水稻黑条矮缩病毒带毒的灰飞虱虫量为4‑6头/株；5)灰飞虱饲养温度为23‑27℃。