3-羟基异丁酸的生物技术制备

摘要

本发明涉及方法，其包括以下步骤：a）提供异丁酸，b）使异丁酸与异丁酸激酶和磷酸转异丁酰酶和/或异丁酰辅酶A合成酶/连接酶和/或异丁酸辅酶A转移酶的组合接触，c）使步骤a）的产物与异丁酰辅酶A脱氢酶接触，d）使步骤b）的产物与甲基丙烯酰辅酶A水合酶接触，和e）水解步骤d）的产物以形成3-羟基异丁酸，其中至少一种所述酶以细胞的形式使用，其相比于它的野生型，包含降低的3-羟基异丁酸脱氢酶或其变体的活性；本发明还涉及细胞，其具有至少一种选自异丁酰辅酶A合成酶/连接酶、异丁酸辅酶A转移酶、异丁酸激酶、磷酸转异丁酰酶、异丁酰辅酶A脱氢酶、甲基丙烯酰辅酶A水合酶和3-羟基异丁酰辅酶A水解酶的酶，和相比于它的野生型降低的3-羟基异丁酸脱氢酶或其变体的活性，其中所述细胞此外优选具有单加氧酶，更优选AlkBGT型的单加氧酶或其变体；本发明进一步涉及此类细胞用于制备3-羟基异丁酸的用途。

主权项

方法，其包括以下步骤：a) 提供异丁酸，b) 使异丁酸与异丁酸激酶和磷酸转异丁酰酶和/或异丁酰辅酶A合成酶/连接酶和/或异丁酸辅酶A转移酶的组合，c) 使步骤b）的产物与异丁酰辅酶A脱氢酶接触，d) 使步骤c）的产物与甲基丙烯酰辅酶A水合酶接触，和e) 水解步骤d）的产物以形成3‑羟基异丁酸，其中以细胞的形式提供至少一种在步骤b）、c）和d）中使用的选自异丁酸激酶、磷酸转异丁酰酶、异丁酰辅酶A合成酶/连接酶和异丁酸辅酶A转移酶的酶，优选地所有的酶均以细胞的形式提供，所述酶具有相比于它的野生型降低的3‑羟基异丁酸脱氢酶或其变体的活性。