一种香樟成年态潜在试管开花材料的选择及植株再生方法

摘要

本发明公开了一种香樟成年态潜在试管开花材料的选择及植株再生方法，具体方法是：(1)于12月底至次年1月间，选取树龄8-10年，胸径为13.5cm左右的成年健康香樟的当年生具鳞芽枝条作为外植体来源；(2)将消毒处理后的成年态具节茎段接种于萌发培养基上，诱导茎段萌发；(3)将萌发枝条接种于扩繁培养基上，增殖形成单株无性系，建立茎段培养苗扩繁体系；(4)将茎段培养苗的茎切段转入诱导培养基进行不定芽诱导培养，建立香樟茎段培养苗茎切段植株再生体系。本发明提供一种香樟组织培养方法，该培养方法取材方便，材料来源、数量充足，容易获得无菌材料；成年态材料的判定方法，方法简单，结论可靠。

主权项

一种香樟成年态潜在试管开花材料的选择及植株再生方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：(1)香樟成年态潜在试管开花材料的的判定：成年香樟树龄8‑10年，胸径约为13.5cm，立地条件良好，树体健壮无明显外部损伤的当年生具鳞芽茎段，其鳞芽于次年3月底‑4月初，萌动发芽后，具花芽小枝占调查鳞芽比达95％以上，确定为香樟成年态潜在试管开花材料；(2)香樟外植体的选择：于12月底至次年1月间，从步骤(1)确定的香樟成年态潜在试管开花材料中选取成年健康香樟的当年生具鳞芽枝条作为外植体来源；(3)香樟外植体的处理：从步骤(2)选择的外植体来源中采集直径在2‑3mm的香樟当年生枝条，枝条上每节均有鳞芽；去除鳞芽、叶片和叶柄，自来水下流水冲洗30min；将仅有叶痕留存的枝条，用手术剪按照一个外植体上一个叶痕的方式处理香樟枝条，获得长度在1.5‑2cm的香樟具节茎段；(4)香樟植株再生：将步骤(3)处理后的香樟具节茎段进行消毒处理，然后接种于萌发培养基诱导其萌发，光照培养；将来诱导出丛枝数多的成年态材料切割分离转入萌发培养基进行继代，扩大繁殖建立高增殖系数的茎段培养苗无性系，作为稳定的成年态茎切段供应来源，即成年态茎段培养苗扩繁体系；以成年态茎段培养苗茎切段为外植体，转入诱导培养基诱导其不定芽形成，建立茎段培养苗茎切段再生体系，光照培养；茎切段再生不定芽转入MS培养基进行壮苗生长。