一种正品大黄种子的检测方法

摘要

本发明公开了一种正品大黄种子的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：（1）取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，除去甲醇，酸水解，用有机溶剂萃取，得有机溶剂层，回收溶剂至干，再溶解，制成供试品溶液；（2）取芦荟大黄素对照品，溶解，制备对照品溶液；（3）用高效液相色谱法检测，在供试品溶液的色谱图中，有色谱峰与芦荟大黄素对照品色谱峰保留时间一致，鉴定待检种子中含有正品大黄种子，色谱条件如下：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：甲醇-0.1％磷酸溶液，二者的体积比为（80~90）：（10~20）；检测波长：254nm。本发明正品大黄种子的检测方法准确度高，操作方便，成本低廉，市场应用前景良好。

主权项

一种正品大黄种子的检测方法，其特征在于：所述检测方法是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：（1）取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，除去甲醇，酸水解，用有机溶剂萃取，得有机溶剂层，回收溶剂至干，再溶解，制成供试品溶液；（2）取芦荟大黄素对照品，溶解，制备对照品溶液；（3）用高效液相色谱法检测，在供试品溶液的色谱图中，鉴定供试品溶液中是否有色谱峰与芦荟大黄素对照品色谱峰保留时间一致，色谱条件如下：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：甲醇‑0.1％磷酸溶液，二者的体积比为（80~90）：（10~20）；检测波长：254nm；步骤（1）中所述酸水解，用于酸水解的溶液中氢离子的浓度为2~3mol/L；所述有机溶剂为三氯甲烷；所述步骤（1）中，将待检种子粉碎，过四号筛，得粉末，加甲醇，粉末与甲醇的质量体积比为1：150~185，加热回流30~90min，冷却，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，得续滤液，挥去溶剂，加浓度为6~10%的盐酸，超声处理1~3min，加等体积的三氯甲烷，加热回流60~80min，再用三氯甲烷萃取3次，每次所用三氯甲烷体积同盐酸体积，得三氯甲烷层，回收溶剂至干，加甲醇制成供试品溶液；所述质量体积比是指g：ml；所述检测方法还包括定性检测方法，步骤如下：1）取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，挥去溶剂，酸溶液水解，用有机溶剂萃取，得水层；2）取步骤1）所得水层，加1~3倍体积的浓氨水，震摇，检测是否有红棕色至棕褐色絮状沉淀；步骤1）中所述酸水解，用于酸水解的溶液中氢离子的浓度为0.52~2mol/L；有机溶剂为乙醚所述步骤1）中，将待检种子粉碎成细粉，加甲醇，细粉与甲醇的质量体积比为1:15~25，浸泡30min~90min，过滤，得滤液，蒸干，加水，再加浓盐酸，盐酸体积为水体积的1/20~1/5，加热回流20~40min，冷却，用乙醚萃取，萃取2次，每次所用乙醚体积为水体积的3~5倍，得水层；所述质量体积比是指g：ml；若前述步骤（3）中，供试品溶液中有色谱峰与芦荟大黄素对照品色谱峰保留时间一致，并且，前述步骤2）中，无红棕色至棕褐色絮状沉淀，则鉴定待检种子为正品大黄种子。