一种空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选及功能鉴定方法

摘要

本发明涉及医学检测或疫苗研究领域，一种空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选及功能鉴定方法是基于空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选来进行的并包括如下步骤：(I)采用TMpred和TMHMM软件、采用ProDom和Pfam软件、采用BepiPred软件、采用DNASTAR软件进行分析；(II)采用clustalw软件进行OMP18基因核苷酸序列同源性比较；(III)采用空肠弯曲菌全菌抗体IgG为一抗，基于ELISA技术对优势线性B细胞抗原表位进行检测筛选鉴定，发现三个B细胞抗原表位都能有效结合空肠弯曲菌全菌抗体。本发明建立起了空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选和鉴定方法，能为后续空肠弯曲菌感染的血清学方法建立及疫苗研发提供候选抗原。

主权项

一种空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选及功能鉴定方法，其特征在于：所述一种空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选及功能鉴定方法是基于空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选来进行的，并包括如下步骤：(I)采用TMpred和TMHMM软件预测OMP18蛋白的跨膜结构域、采用ProDom和Pfam软件预测蛋白的功能结构域、采用BepiPred软件预测OMP18蛋白的线性B细胞表位、采用DNASTAR软件对OMP18蛋白中存在的二级结构、亲水性和抗原性进行分析，结果表明外膜蛋白OMP18定位于空肠弯曲菌外膜且不存在跨膜结构，存在三个线性B细胞表位，且具有良好的亲水性和抗原性；(II)采用clustalw软件进行OMP18基因核苷酸序列同源性比较，该基因序列仅保守存在于不同空肠弯曲菌菌株中，且序列高度同源，相似度达99％；(III)采用空肠弯曲菌全菌抗体IgG为一抗，基于ELISA技术对优势线性B细胞抗原表位进行检测筛选鉴定，发现三个B细胞抗原表位都能有效结合空肠弯曲菌全菌抗体；通过上述三个步骤，建立起空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选和鉴定方法，能为后续空肠弯曲菌感染的血清学方法建立及疫苗研发提供候选抗原。