包含优良事件EE-GH6的抗虫棉花植物及其鉴定方法

摘要

本发明提供特定的转基因棉花植物、植物材料和种子，其特征在于这些产品在棉花基因组的特定位置包含特定优良转化事件。本发明也提供允许快速和明确鉴定生物样品中的该事件的工具。

主权项

鉴定生物样品中下述外源DNA的存在的方法，所述外源DNA包含处于花椰菜花叶病毒35S启动子控制下，与Rubisco小亚基转运肽有效连接的经修饰cry2Ae基因的编码序列，所述外源DNA侧接5’侧翼区，所述5’侧翼区位于该外源DNA的紧上游区并与之相邻，所述5’侧翼区具有SEQ ID No1的1‑140位核苷酸的核苷酸序列，或SEQ ID No11的1‑463位核苷酸的核苷酸序列；所述外源DNA侧接3’侧翼区，所述3’侧翼区位于该外源DNA的紧下游区并与之相邻，所述3’侧翼区具有SEQ ID No2的113‑438的核苷酸序列的互补序列，其中侧接所述5’和3’侧翼区的所述外源DNA存在于以保藏号PTA‑8398保藏在ATCC的参考种子中(“EE‑GH6”)，该方法包括用特异识别EE‑GH6的5’或3’侧翼区的特异引物或探针检测EE‑GH6特异性区域，所述方法包括：a)利用聚合酶链式反应用至少两种引物从存在于所述生物样品中的核酸扩增100到500bp的DNA片段，所述引物具有17‑50长的核苷酸，其中(i)所述引物之一由SEQ ID No1的1‑140位核苷酸的17‑50个核苷酸的核苷酸序列的部分序列组成，或由SEQ ID No11的1‑463位核苷酸的17‑50个核苷酸的核苷酸序列的部分序列组成；所述引物中的另外一条引物由SEQ ID No1的141‑192位核苷酸的互补核苷酸序列的17‑50个核苷酸的部分序列组成，或(ii)所述引物之一由SEQ ID No2的113‑438位核苷酸的17‑50个核苷酸的核苷酸序列的部分序列组成；所述引物中的另外一条引物由SEQ ID No2的1‑112位核苷酸的17‑50个核苷酸的核苷酸序列的部分序列组成；或b)将生物样品的核酸与EE‑GH6的特异探针杂交，其中所述特异探针由具有SEQ ID No1的120‑160位核苷酸的序列的SEQ ID No1部分序列组成，或具有SEQ ID No2的102‑123位核苷酸的SEQ ID No2部分序列组成。