用于分离纯化的RNA的试剂和方法

摘要

本发明提供了分离基本上不含DNA、称为纯RNA的完整RNA的组合物和方法。可以分离任何来源(例如，人类、其他动物、植物、病毒等)的RNA。在一个实施方式中，样品用pH值小于4的酚处理，并从水相中回收纯RNA。在另一实施方式中，从含有少量有机溶剂的酸化样品中沉淀RNA。公开了其他实施方式。通过调节pH，同样的本发明的组合物可以用于多种实施方式。通过本发明的方法得到的纯RNA可以用于不希望DNA污染的试验，例如，聚合酶链式反应。

主权项

一种从生物学样品中分离纯化的RNA的方法，该方法包括：a)用包括终浓度范围从10％重量/重量至60％重量/重量的酚以及至少一种核糖核酸酶抑制剂的试剂处理所述生物学样品，b)将步骤a)的混合物与至少一种疏水溶剂和缓冲液混合，所述缓冲液的浓度足以维持pH范围为3.6≤pH≤3.9，c)通过沉降从步骤b)所获得的混合物中分离水相，并通过用等体积水溶性有机溶剂来沉淀而从水相回收纯化的RNA，其是通过反转录聚合酶链反应测定而不显示DNA存在的RNA，以及d)洗涤并溶解所述沉淀的RNA。