双柱固相萃取-液相色谱法测定烟草中吡蚜酮残留量的方法

摘要

本发明提供了一种双柱固相萃取-液相色谱法测定烟草中吡蚜酮残留的方法，包括以下步骤：（1）标准溶液的配制：称取一定质量吡蚜酮标准品，用甲醇溶解定容，制成吡蚜酮标准储备液，将吡蚜酮标准储备液逐级稀释，配制成系列浓度标准工作液；（2）提取：用甲醇提取烟草中吡蚜酮残留；（3）采用双柱固相萃取净化；（4）液相色谱检测；（5）建立标准曲线；（6）计算分析吡蚜酮残留量。本发明的检测方法具有简便、准确、迅速、可靠的特点，对控制烟草中吡蚜酮残留、指导吡蚜酮在烟草上的安全合理使用具有重要价值。

主权项

一种双柱固相萃取‑液相色谱法测定烟草中吡蚜酮残留的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）标准溶液的配制：称取一定质量吡蚜酮标准品，用甲醇溶解定容，制成吡蚜酮标准储备液，将吡蚜酮标准储备液逐级稀释，配制成系列浓度标准工作液；（2）提取：称取烟草样品置于锥形瓶中，加入烟草样品的3～30倍甲醇，经振荡后过滤，浓缩近干；（3）净化：浓缩瓶中残留物用水溶解，转入甲醇、水预淋洗的C18固相小柱中，甲醇‑水混合溶液淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，加入甲醇‑二氯甲烷混合溶液重新溶解，转入甲醇‑二氯甲烷混合溶液预淋洗的PSA固相小柱中，甲醇‑二氯甲烷混合溶液洗脱，收集流出液，浓缩，定容；（4）检测：待仪器稳定后，用步骤（1）配制的系列浓度标准工作液进样，液相色谱检测，在此基础上，对步骤（3）收集的净化样品进行液相色谱检测；液相色谱检测条件为：高效液相色谱仪‑二极管阵列检测器，Waters Alliance e2695/2998；色谱柱：XBridgeC18，5.0μm，4.6×250mm；流动相：乙腈/水溶液；柱温：常温；测定波长：298nm；进样量：10μL；梯度洗脱条件如下表：（5）标准曲线的建立：以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；（6）结果分析：按以下公式计算试样中吡蚜酮的含量$R=\frac{C_1\times V_1\times S_2\times V_2}{V_3\times S_1\times W}$R—样品中吡蚜酮残留量，单位mg/kg；C₁—标准溶液浓度，单位mg/L；V₁—标准溶液进样体积，单位μL；V₂—样品溶液最终定容体积，单位mL；V₃—样品溶液进样体积，单位μL；S₁—标准溶液的峰高，AU；S₂—样品溶液的峰高，AU；W—样品称取质量，单位g。