主权项 |
一种具有解酒功能厌氧菌的筛选方法,其特征在于它包括如下步骤:1)分别配制液体富集培养基和固体筛选培养基;2)取发酵乳、泡菜发酵食品样品5~8 g;3)将步骤2)的食品样品于步骤1)的液体富集培养基中厌氧培养5~10 h,使乙醇耐受菌充分富集,得到富集培养液;4)将固体培养基加热融化,然后冷却至45℃,迅速将1 mL富集培养液与之混合,摇匀后放入厌氧培养箱中、37℃条件下培养,直至长出菌落,得到具有解酒功能厌氧菌株;5)对具有解酒功能厌氧菌株分离纯化,并得到具有解酒功能厌氧菌株的纯培养物;6)将具有解酒功能厌氧菌株的纯培养物接于MRS液体培养基于厌氧培养箱中、36~38℃条件下培养36~48 h,得到菌液;7)各取200 μL菌液,以空白培养液作为参照,分光光度计下600 nm处测定样品菌液相对浓度OD<sub>600</sub>,根据读数用无菌水稀释菌液至相同菌液浓度10<sup>6</sup>~10<sup>8</sup> cfu/mL;8)将稀释的菌液5 mL分别与等体积5 %~80 %(v/v)乙醇迅速混合均匀,厌氧环境37℃静置0.5~1 h,进行解酒反应;9)测定解酒反应前后乙醇浓度的变化值,比较即可得到各初筛菌株的解酒能力的定量大小,选取性能突出的菌株即可。 |