长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株及构建方法

摘要

本发明属于医学分子生物学领域。本发明所述的长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株是将设计合成的F链5’-GATCCTGGCACAAGAAGATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCATTTTTG-3’和R链5’-AATTCAAAAATGGCACAAGAATATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCAG-3’经退火形成DNA双链，然后插入慢病毒载体pLVX-shRNA2中，再感染A375细胞，使得这一DNA双链整合到A375细胞的基因组中，靶向敲减A375细胞内源性GAS5表达90％以上的稳转细胞株。与传统的反义核酸技术相比，本发明具有特异性强、针对性强、级联放大等优点。

主权项

一种长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株，其特征在于是将设计合成的F链5’‑GATCCTGGCACAAGAAGATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCATTTTTG‑3’和R链5’‑AATTCAAAAATGGCACAAGAATATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCAG‑3’经退火形成DNA双链，然后插入慢病毒载体pLVX‑shRNA2中，再感染A375细胞，使得这一DNA双链整合到A375细胞的基因组中，靶向敲减A375细胞内源性GAS5表达90％以上的稳转细胞株。