| 发明名称 | 一种制备动物转基因阳性单细胞克隆的方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种制备动物转基因阳性单细胞克隆的方法，步骤为：（1）构建包括目的基因、荧光标记基因和药物筛选标记基因的质粒；（2）质粒转染已培养至对数生长期的宿主动物细胞；（3）经转染的细胞生长恢复后，进行消化、离心和重悬稀释，再置于荧光显微镜下，用内径20~80μm的吸针吸取表达荧光标记基因的单个细胞，分别接种至不同份的细胞培养基中；（4）各单个细胞生长成克隆团后，消化其中稳定表达荧光标记基因的细胞克隆团进行传代扩增，即得到转基因阳性单细胞的克隆。该方法转基因阳性单个细胞分离和接种技术操作简单快速、克隆形成率高，大大简化了不同转基因动物个体的检测鉴定工作，降低检测成本，省时省力。 | ||
| 申请公布号 | CN103937746A | 申请公布日期 | 2014.07.23 |
| 申请号 | CN201410097949.8 | 申请日期 | 2014.03.18 |
| 申请人 | 广东温氏食品集团股份有限公司 | 发明人 | 吴珍芳;贺晓燕;张献伟;李紫聪;刘德武;石俊松;周荣 |
| 分类号 | C12N5/10(2006.01)I;C12N15/87(2006.01)I;C12N5/073(2010.01)I | 主分类号 | C12N5/10(2006.01)I |
| 代理机构 | 广州市深研专利事务所 44229 | 代理人 | 陈雅平 |
| 主权项 | 一种制备动物转基因阳性单细胞克隆的方法，其特征在于，步骤如下：（1）构建包括目的基因、荧光标记基因和药物筛选标记基因的质粒；（2）步骤（1）获得的质粒转染已培养至对数生长期的宿主动物细胞；（3）质粒转染后的宿主动物细胞经过生长恢复后，进行消化、离心和重悬稀释，再置于荧光显微镜下，用内径20~80μm的吸针吸取表达荧光标记基因的单个细胞，分别接种至不同份的细胞培养基中；（4）各单个细胞生长成克隆团后，消化其中稳定表达荧光标记基因的细胞克隆团进行传代扩增，即得到转基因阳性单细胞的克隆。 | ||
| 地址 | 527439 广东省云浮市新兴县簕竹镇榄根 | ||