发明名称 |
以痕量DNA为基础的二代测序文库构建方法 |
摘要 |
本发明涉及一种针对痕量DNA样本的二代测序文库的构建方法,利用随机碱基对每一个原始分子进行标定,进而通过现有的二代测序平台获得相应的DNA文库。本方法通过微量细胞分离、总DNA提取、插入片段的构建、PCR扩增基因组文库及及琼脂糖凝胶电泳回收目的片段等步骤,成功构建只需10-40ngDNA起始的全基因组二代测序文库。 |
申请公布号 |
CN103938277A |
申请公布日期 |
2014.07.23 |
申请号 |
CN201410158326.7 |
申请日期 |
2014.04.18 |
申请人 |
中国科学院北京基因组研究所 |
发明人 |
杨祖玉;王开乐;吴大飞;吕雪梅;吴仲义 |
分类号 |
C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C40B50/06(2006.01)I |
代理机构 |
北京市诚辉律师事务所 11430 |
代理人 |
郎坚;唐宁 |
主权项 |
本发明涉及一种针对痕量DNA样品,构建二代测序文库的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤: 步骤(1)、细胞分离及细胞总DNA提取; 步骤(2)、构建Inserting DNA1与Inserting DNA2插入序列双链; 步骤(3)、以步骤(2)所获得的插入序列双链组装插入复合体; 步骤(4)、以插入复合体打断待测DNA,PCR扩增测序片段; 步骤(5)、回收扩增的PCR片段,并进行测序建库工作。 |
地址 |
100101 北京市朝阳区北辰西路1号院104号楼 |