发明名称 |
加强了toyF表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途 |
摘要 |
本发明公开一种加强了toyF表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途。它过量表达了生物合成丰加霉素的关键酶-腺苷琥珀酸裂解酶编码基因<i>toy</i>F,具有比淀粉酶产色链霉菌(<i>Streptomycesdiastatochromogenes</i>)1628更高的丰加霉素合成能力。构建过程如下:1)构建表达载体pIB139-<i>toy</i>F; 2)利用接合转移法将所述的表达载体整合入淀粉酶产色链霉菌染色体,获得所述的工程菌。利用pIB139载体上的启动子permE*启动<i>toy</i>F基因的表达,利用接合转移法将载体pIB139-<i>toy</i>F特异性的整合入淀粉酶产色链霉菌(<i>Streptomycesdiastatochromogenes</i>)1628的染色体,获得了遗传稳定的工程菌。与原始菌株相比,重组菌腺苷琥珀酸裂解酶酶活提高了0.9倍,丰加霉素产量至少提高20.5%。 |
申请公布号 |
CN103320372B |
申请公布日期 |
2014.07.23 |
申请号 |
CN201310168980.1 |
申请日期 |
2013.05.08 |
申请人 |
中国计量学院 |
发明人 |
马正;俞晓平;陶立彬;申屠旭萍;边亚琳;郝培应;许益鹏 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N15/60(2006.01)I;C12N15/76(2006.01)I;C12P19/40(2006.01)I;C12R1/525(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
杭州求是专利事务所有限公司 33200 |
代理人 |
张法高 |
主权项 |
一种加强了<i>toy</i>F表达的重组淀粉酶产色链霉菌,其特征在于:它表达了腺苷琥珀酸裂解酶编码基因<i>toy</i>F,具有比原始菌淀粉酶产色链霉菌(<i>Streptomyces</i><i> diastatochromogenes</i>) 1628更高的丰加霉素表达能力;原始菌为淀粉酶产色链霉菌1628,保藏编号为CGMCC NO. 2060;所述的腺苷琥珀酸裂解酶编码基因<i>toy</i>F来自于待重组的原始菌淀粉酶产色链霉菌1628,GenBank登录号为:JQ267374.1;所述的腺苷琥珀酸裂解酶编码基因<i>toy</i>F整合入原始菌淀粉酶产色链霉菌 1628 染色体。 |
地址 |
310018 浙江省杭州市江干经济开发区学源街 |