纤维酶体基因的改建方法及获得的新型纤维素酶

摘要

本发明涉及一种纤维酶体基因的改建方法及通过基因改建获得的新酶，具体涉及一种以热纤梭菌的纤维酶体和它的单体酶为基础的基因改建方法，及基因改建产生的新型木质纤维水解酶，属于基因工程和酶工程领域。本发明是通过基因重组技术，切除纤维酶体的单体酶肽链中的锚定域以减少冗余部件、用1个短链将支架蛋白上的CBD嫁接到单体酶的分子上，获得具有不同分子结构、能够独立结合底物、比单体酶活性高的新型独立酶；本发明还建立了这种新酶的超量表达技术。本发明成功获得了不依赖于纤维酶体结构的新型纤维素酶NcelD；并且该新型酶NcelD水解CMC的活性、酶的稳定性比自然单体酶CelD有明显的提高；基因改建获得的NcelD编码基因在pHsh系统中得到可溶性超量表达。

主权项

一种纤维酶体基因的改建方法，其特征在于，所述方法包括克隆目标基因、删除单体酶上的冗余序列、嫁接纤维素结合域步骤。