一种重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽的生产方法

摘要

一种重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽的生产方法本发明涉及一种重组人形态发生蛋白2成熟肽的生产方法。该方法通过将复性好的重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽溶液上样于经平衡好的疏水层析柱，然后用洗脱缓冲液进行盐浓度逐步降低的阶梯梯度洗脱，收集目标峰。为进一步提高目标峰的蛋白纯度，纯化方法可以是多步疏水作用层析或者与离子交换层析联合使用。该方法具有操作更简便、成本更低廉、纯化收率更高(大于20％)、纯度更高(SDS-PAGE、HPLC及HPCE均大于97％)等优点，适合用于重组人骨形态发生蛋白家族的生产。

主权项

一种重组人骨形态发生蛋白‑2成熟肽的纯化生产方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将复性好的重组人骨形态发生蛋白‑2成熟肽溶液上样于经平衡好的疏水层析柱，上样完毕后继续用平衡缓冲液冲洗到达基线，所述的平衡缓冲液包含10‑15mM2‑环己胺基乙磺酸、0.2‑0.8M尿素、2‑4%N,N‑二甲基甲酰胺、1‑3M氯化钠或者硫酸铵和10‑50mM三羟甲基氨甲烷‑HCl，pH为7.0‑9.0；（2）用洗脱缓冲液进行盐浓度逐步降低的阶梯梯度洗脱，收集目标峰，所述的洗脱缓冲液包含10‑15mM2‑环己胺基乙磺酸、0.2‑0.8M尿素、2‑4%N,N‑二甲基甲酰胺和10‑50mM三羟甲基氨甲烷‑HCl，pH为7.0‑9.0。