植物提取液中单宁含量的检测方法

摘要

本发明涉及植物提取液中单宁含量的检测方法，该方法的步骤主要是：制备显色液；制备单宁标注溶液；确定单宁标准溶液对波长在400～700nm范围的光波的最大吸收波长；制备单宁标准曲线，该标准曲线以各份混合溶液中单宁的浓度c为横坐标，以各份混合溶液对前述最大吸收波长的吸光度A为纵坐标制图；检测待测单宁待测单宁样品溶液对步骤3中确定的最大吸收波长的吸光度A’；通过公式计算待测单宁样品溶液中单宁的含量。本方法的检测结果受外界因素的干扰较小，且该方法的重现性好，对多种植物中单宁含量的检测具有普遍性。

主权项

植物提取液中单宁含量的检测方法，其特征在于，具体步骤如下：步骤1：制备显色液，将0.1 mol/L的氯化铁水溶液和0.3mol/L的硫氰酸胺水溶液按照1：1的体积混合； 步骤2：取单宁标准品溶于蒸馏水中得到浓度为0.2mg/mL的单宁水溶液作为单宁标准溶液；步骤3：取1.0mL步骤2中的单宁标准溶液至最大刻度为10ml的容量瓶中，并往所述单宁标准溶液中依次加入0.1～0.5mL显色液和0.2～1.2mL浓度为10^‑3mol/L的氢氧化钠水溶液，再加入体积比为70%～80%的二甲基甲酰胺水溶液至该容量瓶的最大刻度后摇匀，并室温避光静置10～20min；然后以体积比为70%～80%的二甲基甲酰胺水溶液为参比，用紫外‑可见分光光度计检测加入所述显色液、氢氧化钠水溶液和二甲基甲酰胺水溶液后的单宁标准溶液对波长在400～700nm范围的光波的光谱曲线，并确定在该范围内单宁标准溶液的最大吸收波长；步骤4：取步骤2中的单宁标准溶液0.0 mL，0.5 mL，1 mL，1.5 mL，2.0 mL，2.5 mL和3.0mL分别置于7只最大刻度为10mL的容量瓶中，往7只容量瓶中分别依次加入显色液和氢氧化钠水溶液，再加入二甲基甲酰胺水溶液至各个容量瓶最大刻度得到7份单宁浓度c各不相同的混合溶液，分别将7份混合溶液摇匀，并室温避光静置10～20min；然后以二甲基甲酰胺水溶液为参比，其中，显色液的用量与步骤3中的相同、氢氧化钠水溶液的用量及浓度与步骤3中的相同，采用的二甲基甲酰胺水溶液的体积比与步骤3中的相同，用紫外‑可见分光光度计检测所述各份混合溶液对步骤3中确定的单宁标准溶液对波长在400～700nm范围的光波的最大吸收波长的吸光度A；然后以各份混合溶液中单宁的浓度c为横坐标，各份混合溶液对步骤3中确定的单宁标准溶液对波长在400～700nm范围的光波的最大吸收波长的吸光度A为纵坐标制图，该图作为单宁标准曲线；步骤5：取1.0ml待测单宁样品溶液置于最大刻度为10mL的容量瓶中，往所述待测单宁样品溶液中依次加入显色液和的氢氧化钠水溶液，再加入二甲基甲酰胺水溶液至该容量瓶的最大刻度得到待测单宁样品混合溶液，将待测单宁样品混合溶液摇匀，并室温避光静置10～20min，以二甲基甲酰胺水溶液为参比，其中，显色液的用量与步骤3中的相同、氢氧化钠水溶液的用量及浓度与步骤3中的相同，采用的二甲基甲酰胺水溶液的体积比与步骤3中的相同，用紫外‑可见分光光度计检测单宁样品溶液对步骤3中确定的单宁标准溶液对波长在400～700nm范围的光波的最大吸收波长的吸光度A^’；步骤6：根据式（1）计算待测单宁样品溶液中单宁的含量：（1）式中， y 为根据步骤5得到的A^’ 值为待测单宁样品溶液中单宁的浓度，该浓度通过查询步骤4中制得的单宁标准曲线获得， n为待测单宁样品溶液加入显色液、氢氧化钠水溶液及二甲基甲酰胺水溶液前后单宁浓度的比，V为提取的单宁样品溶液的体积，单位是mL，m为待测样品的质量，单位为g。